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peter0107

铜虫 (初入文坛)

[求助] 有关禽类病毒分离鉴定

鸡的病毒分离鉴定
按照我们实验室从前的SOP进行,前面步骤略过,现在手里拿到尿囊液,做了HA,引起血凝,结果为5log2,不知是那种病毒引起的血凝,开始HI鉴定,做了ND,H9,EDS的HI,结果ND为1log2,H9为4log2,EDS为0log2,最终判定为H9亚型感染。
以上为整个实验过程,下面提出我的疑问。
1. HA判定阳性标准为≥4log2,大于等于我理解,4log2这个标准值是怎么定出来的?
2. HI鉴定只是个定性,而且用的是阳性血清,出抗体效价有意义吗?而且SOP竟然写的也是≥4log2,为什么又是4log2?为什么是大于等于?按道理说越往后阳性血清浓度越小,HI稀释的是抗体,16倍的抗体浓度比32倍抗体浓度大,16倍稀释到临界点与32倍稀释到临界点相比,说明16倍那个里面抗原浓度高,临界点推后的话说明检出的抗原浓度就低,不应该判为阳性啊?
3. SOP里面HI用的是25ml的PBS,这加上后面25ml的4单位抗原,25ml红细胞,抗原最终浓度应该是1.333单位不是1单位啊,应该是50ml的PBS才对吧?
4. 我一直怀疑我实验室的SOP到底规不规范。
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