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weining1203

新虫 (小有名气)

引用回帖:
10楼: Originally posted by wyz4626 at 2012-04-01 10:51:03:
多糖等杂质含量太高,除杂做的不好。RNA提取要在保证质的前提下,再追求量。takara的试剂盒做不了这个的,可以试一下天泽的盒子。

谢谢,我用的就是takara专门针对多糖多酚的盒子,能仔细分析下吗
11楼2012-04-01 11:08:10
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我爱沈泉

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我们一般都用天根的,效果很好 并且稳定 一年四季都可以提取  你的图上上面一条带应该是基因组DNA但下面的带就很诡异了 因为如果按分子量大小的话应该是RNA 的 5s, 但是太亮啦 呵呵 。。。。。
12楼2012-04-01 15:59:27
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weining1203

新虫 (小有名气)

引用回帖:
12楼: Originally posted by 我爱沈泉 at 2012-04-01 15:59:27:
我们一般都用天根的,效果很好 并且稳定 一年四季都可以提取  你的图上上面一条带应该是基因组DNA但下面的带就很诡异了 因为如果按分子量大小的话应该是RNA 的 5s, 但是太亮啦 呵呵 。。。。。

谢谢回复!很诡异???,那是什么东东啊。。。
13楼2012-04-01 16:43:15
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atlanticwi

金虫 (正式写手)

琴美喜欢发呆 不喜欢发脾气

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
西瓜: 金币+4, MolEPI+1, 能回答问题就不晚哈 2012-04-02 11:44:12
weining1203: 金币+2, ★★★很有帮助 2012-04-18 10:06:10
嗯...............
来晚了............
个人经验:
首先确保你的RNA纯度,那是用分光光度法测量光吸收值,单纯跑胶不能说明问题。再者,你又提的是针叶类(是叶子吗,假定就是叶子的话),存在很厚的角质、蜡质层是很常见的吧。这有需要单独除杂处理,我没有做个这类植物,建议你查查文献如何处这类植物的杂质,而并非是用盒子就以为完事了。如果是多糖多酚类物质富含的话,好像提出的核酸会褐化还是怎么,需要加PVPP?我依稀记得以前师姐是遇到的是这样的情况,总之建议先看文献再下手。
希望有所帮助,若有说错请高手指正
Let God do with it as He wills
14楼2012-04-01 17:50:16
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我爱沈泉

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
13楼: Originally posted by weining1203 at 2012-04-01 16:43:15:
谢谢回复!很诡异???,那是什么东东啊。。。

具体就不知道啦 我提取茶叶很很多酚的植物 用了天根的试剂盒就解决了 。。。。不过你还是得查有关你提取植物的文献再根据自己的实验条件摸索最佳的提取方法啊。。。
15楼2012-04-01 18:00:03
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weining1203

新虫 (小有名气)

引用回帖:
14楼: Originally posted by atlanticwi at 2012-04-01 17:50:16:
嗯...............
来晚了............
个人经验:
首先确保你的RNA纯度,那是用分光光度法测量光吸收值,单纯跑胶不能说明问题。再者,你又提的是针叶类(是叶子吗,假定就是叶子的话),存在很厚的角质、蜡质 ...

谢谢您的分析,我会采纳,我看相关文献用的是ctab-licl方法提取的,没有提到用盒子,呵呵。我用的是比较嫩的那部分,不是叶子,叶子的话好像提不出来。。。
16楼2012-04-02 08:34:24
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weining1203

新虫 (小有名气)

引用回帖:
15楼: Originally posted by 我爱沈泉 at 2012-04-01 18:00:03:
具体就不知道啦 我提取茶叶很很多酚的植物 用了天根的试剂盒就解决了 。。。。不过你还是得查有关你提取植物的文献再根据自己的实验条件摸索最佳的提取方法啊。。。

谢谢。。。
17楼2012-04-02 08:38:46
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xiayongxiu

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
提对糖多酚的不一定要用试剂盒的。我提的是水果果实里面的RNA,参考一篇文献的方法,提取出来的得率还挺高的。A simple and efficient method for isolating RNA from pine trees, Plant molecular biology reporter, 1993, 11 (2): 113-116.专门针对针叶树的,主要裂解液是CTAB,我们实验室简称为CTAB法。另外试剂盒,我们实验室有人用过天跟的,之前也是用我们实验室传统的2种方法都没提出来,换天跟的就提出来了。祝你好运!
一切都要靠自己努力
18楼2012-04-17 20:51:56
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weining1203

新虫 (小有名气)

引用回帖:
18楼: Originally posted by xiayongxiu at 2012-04-17 20:51:56:
提对糖多酚的不一定要用试剂盒的。我提的是水果果实里面的RNA,参考一篇文献的方法,提取出来的得率还挺高的。A simple and efficient method for isolating RNA from pine trees, Plant molecular biology repor ...

谢谢 换了试剂盒提出来了,用的杭州宝赛的。 你说的那片文章我也看过 考虑过用ctab-licl法 不过感觉有点麻烦呵呵。 对了,那个方法你有没有什么改动的地方,估计以后可能要用那个方法提取rna
19楼2012-04-17 22:40:24
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