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xiaoj9663
铁杆木虫 (职业作家)
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【答案】应助回帖
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kinda_: 金币+35, 翻译EPI+1, ★★★★★最佳答案 2012-04-01 13:05:15
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免疫原的制备 照以下步骤，通过MBS法使序列号1表示的肽抗原Cys的N末端与KLH结合形成免疫原。 【0058】 即向10mg KLH/2ml磷酸缓冲液滴加0.8mg MBS/100μl DMF（Dimethylformamide二甲基甲酰胺），室温搅拌30分钟，离心分离后，用磷酸缓冲液（以下用PBS 表示）通过SephadexG-25进行组分分离。分离所得第一个峰的溶液与5mg固相法连续合成的肽（序列号1）进行混合，4℃搅拌过夜得到免疫原。 【0059】 <肽抗体的产生> 上述所得免疫原与弗氏完全佐剂等量混合，得到乳浊液，用该乳浊液0.5-1ml分别对5只日本白色家兔在两周内进行4次皮下注射，免疫开始后两个月进行采血，使用常规方法得到抗血清No.1~5（以下用肽抗体溶液No.1~5表示），用以下程序通过ELISA法对抗体滴度进行测定。 |
2楼2012-04-01 10:18:23
