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tingersunny

新虫 (初入文坛)

[求助] 蛋白质提取

有关蛋白质提取的沉淀方法哪一个好：等电点沉淀、有机溶剂沉淀还有盐析法？
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哈哈，我来了
1楼 2012-03-28 09:15:07
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豆哥

主管区长 (职业作家)

制粒能手

优秀版主优秀版主
★
xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2012-04-04 22:13:00
你所说的可能是盐析法与等电点沉淀法相结合的方法
盐析法一般用透析除盐
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边学边问，才有学问。
4楼2012-03-31 08:44:04
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豆哥

主管区长 (职业作家)

制粒能手

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
xiaoxiao270: 金币+2, 3Q 2012-04-04 22:12:52
1. 一般说来，等电点沉淀法较少用，常结合其它两种方法一起使用
2. 盐析法沉淀的蛋白质，经透析除盐，仍保证蛋白质的活性。调节蛋白质溶液的pH至等电点后，再用盐析法则蛋白质沉淀的效果更好。
3. 有机试剂沉淀法：优点在于：①分辨能力比盐析法高，即蛋白质或其它溶剂只在一个比较窄的有机溶剂浓度下沉淀；②沉淀不用脱盐，过滤较为容易；③在生化制备中应用比盐析法广泛。但是，在常温下，有机溶剂沉淀蛋白质往往引起变性。例如酒精消毒灭菌就是如此。因此，操作要求在低温下进行。
因此，常用的沉淀方法是盐析法。
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边学边问，才有学问。
2楼2012-03-28 09:26:01
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tingersunny

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 豆哥 at 2012-03-28 09:26:01:
1. 一般说来，等电点沉淀法较少用，常结合其它两种方法一起使用
2. 盐析法沉淀的蛋白质，经透析除盐，仍保证蛋白质的活性。调节蛋白质溶液的pH至等电点后，再用盐析法则蛋白质沉淀的效果更好。
3. 有机试剂沉淀 ...

但是我发现好多文献报道大都是等电点沉淀，还有盐析法常用的什么方法简便快速除盐呢？
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哈哈，我来了
3楼2012-03-31 08:41:28
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绝路书生

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2012-04-04 22:13:06
等电点沉淀由于各种蛋白质在等电点时，仍存在一定的溶解度，使沉淀不完全，而多数蛋白质的等电点又都十分接近，所以一般和其它方法联用。或者干脆不用
硫酸铵分级沉淀是常用的方法，沉淀以后可以用透析除盐。
有机溶剂沉淀也很常见，只是溶剂用量大，回收率不高，但蛋白活性高。而且有机溶剂会对蛋白有一定的伤害，所以一般先将有机溶剂负20度冻以后再用
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5楼2012-04-04 20:11:00
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