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luocongqiang

铁虫 (小有名气)

[交流] PCR-DGGE 已有6人参与

请各位大侠给出出主意，老板让我做PCR-DGGE，可是我还一点都不懂这玩意的操作步骤，我想先把样品采了（野外的）要一年，但又怕才完后会跑不出结果，那不就悲剧了啊，会影响到毕业啊，求大侠指点PCR-DGGE好跑吗，我该不该做呢谢谢了啊
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1楼 2012-03-22 11:01:07
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j2

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
做的人很多，，，跑不出结果是什么意思？
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修炼ｉｎｇ，当虫仙……
2楼2012-03-22 11:24:13
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yuer9809

至尊木虫 (著名写手)
建议你找几篇文献看看
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3楼2012-03-22 16:04:46
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xht

铜虫 (小有名气)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
amisking: 金币+2, 鼓励发帖提供有帮助的信息！ 2012-03-22 18:44:37
挺好跑的，采回来的样品放好了，别让dna降解了就好，不然到时候时间长了，结果该不准确了
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4楼2012-03-22 16:19:05
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luocongqiang

铁虫 (小有名气)
★
zhang8826857: 金币+1, 新虫加油 2012-03-22 22:17:44
引用回帖:
2楼: Originally posted by j2 at 2012-03-22 11:24:13:
做的人很多，，，跑不出结果是什么意思？

是这样的，老板让我做先把样采了，要在野外采一年，怕采完回来处理的时候跑不出结果，那样就影响毕业了啊，这是我担心的 谢谢您啊
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5楼2012-03-22 21:25:14
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yupeibin

禁虫 (正式写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
rainwander: 金币+1, 鼓励交流 2012-03-23 08:40:10
本帖内容被屏蔽
6楼2012-03-22 22:20:01
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xiaoyong1982

禁虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
本帖内容被屏蔽
7楼2012-03-23 11:07:04
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luocongqiang

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by xiaoyong1982 at 2012-03-23 11:07:04:
1、样品在-20度保存，-80度更好；
2、提DNA，设计引物PCR扩增，引物记得加GC夹；
3、阳性特异扩增产物跑DGGE，第一次做梯度范围可以大一点，比如30-60%，根据结果再优化。

哦 谢谢啊
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8楼2012-03-23 11:35:27
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DGGE

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
5楼: Originally posted by luocongqiang at 2012-03-22 21:25:14:
是这样的，老板让我做先把样采了，要在野外采一年，怕采完回来处理的时候跑不出结果，那样就影响毕业了啊，这是我担心的 谢谢您啊

没有问题挺好弄的。样品采集了可以先把DNA提取了-20或-80保存起来备用就行了。
或者样品-80保存，等要做的时候一起提取DNA也行。有问题多交流就行，不用发愁。
顺利的，一个月就出结果了。
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9楼2012-04-01 10:21:00
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