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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 求超滤离心管使用说明，经验丰富的说
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joyjane88

铜虫 (初入文坛)

[求助] 求超滤离心管使用说明，经验丰富的说

本人想浓缩蛋白样品，实验室原来没有人用过超滤。想请教大家超滤管的使用说明，从如何选择说起，希望多多给一些细节和注意事项。没有经验的就不要帮忙了，从其他地方荡来的东西很多不靠谱。
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1楼 2012-03-21 11:40:36
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zhang001zh

银虫 (小有名气)
回收的旧管用之前加水离心一下  看看滤膜是不是有破损
离心转速3600到4500都可以，时间一般4-10分钟，如果蛋白容易沉淀浓缩倍数别太高，每次新加入溶液以后吹打与底部原来高浓度的混匀，看看是不是有片状沉淀，没有就继续浓缩

[ 发自小木虫客户端 ]
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7楼2015-01-08 14:29:07
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imyting

至尊木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
amisking: 金币+3, BioEPI+1, 鼓励发帖提供有帮助的信息！ 2012-03-21 20:55:48
joyjane88: 金币+5, ★★★很有帮助 2012-04-12 17:05:09
超滤管的选择要根据你所要浓缩蛋白的大小来确定，要求不是很严格，只要能截留你的蛋白就可以了，我们实验室都是混用的，但是如果你想要起到一定程度的纯化作用除外。使用时也没什么，转速不能太高，我们一般都用4℃、4000rpm离心20分钟，效果不明显得话会再增加时间。不用的时候用双蒸水浸泡放在4℃冰箱。以上仅是我们实验室的使用过程，有不正确的地方还请大家多指教。
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悠哉游哉做实验，成兮败兮我随便
2楼2012-03-21 15:30:03
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mssj300130

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
joyjane88: 金币+5, ★★★很有帮助 2012-04-12 17:05:04
一般超滤离心管浓缩的话需要考虑蛋白的浓度，不要太高，否则可能会有损失；另外每浓缩一次需要把膜底部与新加入的液体混匀，否则将影响下次浓缩效果，另外使用后需要保存在0.1M NaOH或者20%乙醇中，防止涨菌，转速和时间楼上的说的基本上差不多了
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3楼2012-04-10 17:19:04
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小李爱学习

银虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by imyting at 2012-03-21 15:30:03
超滤管的选择要根据你所要浓缩蛋白的大小来确定，要求不是很严格，只要能截留你的蛋白就可以了，我们实验室都是混用的，但是如果你想要起到一定程度的纯化作用除外。使用时也没什么，转速不能太高，我们一般都用4℃ ...

您好，我想问一下，超滤离心管上面写的都是一次性的，可以多次用吗？用多了会不会导致膜破损？
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4楼2013-11-22 23:08:13
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