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小欣1211

金虫 (小有名气)

[求助] 硅胶柱装柱该用什么溶剂

RT 洗脱系统已经选好二氯甲烷和甲醇,那么装柱应该用二氯甲烷么?试验了一下,二氯甲烷挥发性太强,而且很吸热,胶管旁边一层冰霜,怎么办?各位大侠帮帮忙~

[ 来自科研家族 Natural Products家族 ]
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呵呵~~
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小欣1211

金虫 (小有名气)

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2楼: Originally posted by 泡泡-211 at 2012-03-18 14:58:02:
就直接用你的洗脱剂系统了

二氯甲烷么?
呵呵~~
3楼2012-03-18 15:07:41
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小欣1211

金虫 (小有名气)

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4楼: Originally posted by 泡泡-211 at 2012-03-18 15:11:23:
二氯甲烷和甲醇

那么比例是多少呢?不是应该是梯度洗脱最起始的比例100:0么?
呵呵~~
6楼2012-03-18 15:38:18
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小欣1211

金虫 (小有名气)

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5楼: Originally posted by 热爱生命的猪 at 2012-03-18 15:16:32:
一般我们是选择洗脱剂里面极性小的那个。。。。。。你用氯仿装试试

氯仿毒性太大,准备用二氯甲烷洗脱,也用氯仿装柱子?
呵呵~~
7楼2012-03-18 15:39:03
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小欣1211

金虫 (小有名气)

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8楼: Originally posted by 泡泡-211 at 2012-03-18 15:44:02:
抱歉,我现在才明白你前面的意思了,呵呵。你采用的是梯度洗脱,该系统有二氯甲烷和甲醇组成。起始比例应该由薄层层析来摸索了。

梯度洗脱的比例也要薄层来摸索么?不是100:0  99:1 98:2 .......最后用甲醇冲么?
呵呵~~
9楼2012-03-18 15:56:53
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小欣1211

金虫 (小有名气)

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10楼: Originally posted by 泡泡-211 at 2012-03-18 16:11:41:
你不是在问起始比例嘛,肯定要用薄层摸索的。另外,梯度洗脱不是你认为的“100:0  99:1 98:2 .......最后用甲醇”,梯度比例没有必要这么匀称的,最好还是在改变比例前用薄层检查来确定。还需注意因为二氯甲烷易 ...

你一说我更糊涂了,用薄层摸索是看板子上点的比移值?多少合适呢?
呵呵~~
11楼2012-03-18 16:37:53
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小欣1211

金虫 (小有名气)

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12楼: Originally posted by 442316619 at 2012-03-18 16:42:58:
你要是技术好就直接干法装柱,慢慢装也没问题,用湿法装柱就摸下展开剂的比例,呵呵,梯度洗脱没必要那么精确的,10%左右一个梯度一般也没问题

我是新手,湿法还在摸索中,呵呵,薄层我用二氯甲烷,发现有点的比移值在0.3~0.8,那么这个条件就可以作为起始浓度吧?
呵呵~~
14楼2012-03-18 17:21:37
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小欣1211

金虫 (小有名气)

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22楼: Originally posted by luckgoing at 2012-03-19 19:08:36:
你是用湿装的柱子吧,试过干装柱吗,

老师说要用湿法,就一直用湿法,没有试过干法啊
呵呵~~
23楼2012-03-20 10:06:10
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