应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 高效液相色谱使用磷酸盐做流动相时应该注意什么
222/3返回列表上一页123下一页
查看: 6975  |  回复: 21
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

foxcl

铁虫 (正式写手)
引用回帖:
10楼: Originally posted by 痴夷子皮 at 2012-03-20 09:38:41:
缓冲盐会析出是因为流动相中有机相（甲醇或乙腈）比例高所致。防止盐析出就需避免高比例有机相-缓冲盐体系的出现。
正规操作
1、以流动相平衡色谱柱前，先用50%~90%以上的水平衡约30min，再更换上流动相。
2、 ...

同意楼上的。

不过
1、关键在于上次用完之后是否冲洗干净。
2、高盐缓冲冲柱子应先用高水相冲洗柱子30min以上（95%的水+5%甲醇/乙腈），再用纯甲醇/乙腈冲洗
3、最后最好不要用纯乙腈结束，乙腈易形成多聚体，且会和高压泵下单向阀中的红宝石成形成粘性物质，会影响单向阀寿命，也有可能引成压力波动大的现象。
赞一下 回复此楼
11楼2012-03-21 17:55:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

41853930

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
sunmaocheng: 金币+3, ★★★很有帮助 2012-03-29 08:49:26
磷酸钾缓冲液浓度是多少，一般从文献中查到的使用浓度是不会和纯有机相产生盐析出现象的，也就是大家都认可的办法。
如果是自己尝试着使用，确定分析条件，可以先将纯有机相和你使用的缓冲盐混合，观察是否有盐析出（记得是安捷伦的老师提示的），如果有，避免盐对柱子损伤的办法只有降低缓冲盐浓度，使用后充分洗干净柱子，避免纯有机相保存柱子的时候出现问题。此外可用异丙醇冲洗，或二氯甲烷等，一般柱子的说明书上都有处理方式。
赞一下 回复此楼
12楼2012-03-22 11:52:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiwenbing

金虫 (初入文坛)
首先，磷酸钾缓冲溶液最好是现配现用；缓冲溶液与有机溶剂配制的流动相会造成单向阀的堵塞，但如果平时在使用完仪器之后，耐心地用甲醇：水=10:90的流动相冲洗1小时左右，就会有效地预防此现象的发生。
    另外，使用含有缓冲盐的流动相前，最好先用水：乙腈=75：25的流动相平衡一下，也可以解决缓冲盐在柱子中析出的问题。
     以上只是个人的一点心得，希望对你有帮助。
赞一下 回复此楼
坚持每天学习2小时……
13楼2012-05-10 16:53:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sunmaocheng

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
13楼: Originally posted by xiwenbing at 2012-05-10 16:53:45:
首先，磷酸钾缓冲溶液最好是现配现用；缓冲溶液与有机溶剂配制的流动相会造成单向阀的堵塞，但如果平时在使用完仪器之后，耐心地用甲醇：水=10:90的流动相冲洗1小时左右，就会有效地预防此现象的发生。
    另外 ...

谢谢
回复此楼
Sunshine
14楼2012-05-10 19:02:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yugijiang

木虫 (著名写手)
用的时候首先要充分的用不含盐的流动相冲洗，做好之后也得用不含盐的流动相冲洗系统。
赞一下 回复此楼
15楼2012-06-25 09:55:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qqsheshou

新虫 (初入文坛)
用完后，用甲醇水冲洗泵
赞一下 回复此楼
16楼2012-06-25 10:42:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hong_31

木虫 (正式写手)
用盐做流动相主要是怕结晶问题对柱子的损坏吧，注意柱子的清洗
赞一下 回复此楼
tobeabetterman
17楼2012-06-25 14:54:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yugijiang

木虫 (著名写手)
先用不含缓冲盐的流动相冲洗下色谱柱吧，一般20-30倍柱体积就可以了
赞一下 回复此楼
18楼2012-07-04 13:20:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fannis

金虫 (正式写手)
引用回帖:
11楼: Originally posted by foxcl at 2012-03-21 17:55:32
同意楼上的。

不过
1、关键在于上次用完之后是否冲洗干净。
2、高盐缓冲冲柱子应先用高水相冲洗柱子30min以上（95%的水+5%甲醇/乙腈），再用纯甲醇/乙腈冲洗
3、最后最好不要用纯乙腈结束，乙腈易形成多聚体 ...

那用什么 结束呢
回复此楼
爱生活爱媳妇儿~
19楼2013-04-16 02:29:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

resalat61

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
20楼2014-01-17 22:03:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 sunmaocheng 的主题更新
222/3返回列表上一页123下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[论文投稿] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 1uaZt2kAZj2S 2026-10-30 13/650 2026-11-01 16:45 by BCdvBAEpt3zm
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 hKe7U1kad5Sg 2026-10-31 6/300 2026-11-01 15:04 by BCdvBAEpt3zm
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 xvJS1BYDxvBS 2026-10-31 6/300 2026-11-01 15:01 by BCdvBAEpt3zm
[基金申请] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 xvJS1BYDxvBS 2026-10-31 9/450 2026-11-01 14:55 by BCdvBAEpt3zm
[考研] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 xvJS1BYDxvBS 2026-10-31 10/500 2026-11-01 14:50 by BCdvBAEpt3zm
[基金申请] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 xvJS1BYDxvBS 2026-10-31 3/150 2026-11-01 12:53 by BCdvBAEpt3zm
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 xvJS1BYDxvBS 2026-10-31 5/250 2026-11-01 12:51 by BCdvBAEpt3zm
[公派出国] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 1uaZt2kAZj2S 2026-10-31 7/350 2026-11-01 12:40 by BCdvBAEpt3zm
[基金申请] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 1uaZt2kAZj2S 2026-10-31 4/200 2026-11-01 12:38 by BCdvBAEpt3zm
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 1uaZt2kAZj2S 2026-10-30 7/350 2026-11-01 12:27 by BCdvBAEpt3zm
[基金申请] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 1uaZt2kAZj2S 2026-10-30 11/550 2026-11-01 12:24 by BCdvBAEpt3zm
[考研] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 1uaZt2kAZj2S 2026-10-30 16/800 2026-11-01 12:14 by BCdvBAEpt3zm
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 X5bHxOULxFqb 2026-10-30 18/900 2026-11-01 12:11 by BCdvBAEpt3zm
[博后之家] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 1uaZt2kAZj2S 2026-10-31 7/350 2026-11-01 10:48 by BCdvBAEpt3zm
[基金申请] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 1uaZt2kAZj2S 2026-10-30 14/700 2026-11-01 10:43 by BCdvBAEpt3zm
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 1uaZt2kAZj2S 2026-10-30 16/800 2026-11-01 10:27 by BCdvBAEpt3zm
[论文投稿] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +5 X5bHxOULxFqb 2026-10-30 26/1300 2026-11-01 10:22 by BCdvBAEpt3zm
[找工作] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 1uaZt2kAZj2S 2026-10-31 6/300 2026-11-01 03:56 by YXM1FDCSE8Bn
[考博] 2027博士申请-临床检验诊断学、病原生物学、微生物方向 50+3 yyh@ 2026-10-28 4/200 2026-10-31 12:47 by 可淡不可忘
[文学芳草园] 闲聊 +3 myrtle 2026-10-25 6/300 2026-10-29 15:28 by myrtle
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭