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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 高效液相色谱使用磷酸盐做流动相时应该注意什么
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foxcl

铁虫 (正式写手)
引用回帖:
10楼: Originally posted by 痴夷子皮 at 2012-03-20 09:38:41:
缓冲盐会析出是因为流动相中有机相（甲醇或乙腈）比例高所致。防止盐析出就需避免高比例有机相-缓冲盐体系的出现。
正规操作
1、以流动相平衡色谱柱前，先用50%~90%以上的水平衡约30min，再更换上流动相。
2、 ...

同意楼上的。

不过
1、关键在于上次用完之后是否冲洗干净。
2、高盐缓冲冲柱子应先用高水相冲洗柱子30min以上（95%的水+5%甲醇/乙腈），再用纯甲醇/乙腈冲洗
3、最后最好不要用纯乙腈结束，乙腈易形成多聚体，且会和高压泵下单向阀中的红宝石成形成粘性物质，会影响单向阀寿命，也有可能引成压力波动大的现象。
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11楼2012-03-21 17:55:32
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41853930

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
sunmaocheng: 金币+3, ★★★很有帮助 2012-03-29 08:49:26
磷酸钾缓冲液浓度是多少，一般从文献中查到的使用浓度是不会和纯有机相产生盐析出现象的，也就是大家都认可的办法。
如果是自己尝试着使用，确定分析条件，可以先将纯有机相和你使用的缓冲盐混合，观察是否有盐析出（记得是安捷伦的老师提示的），如果有，避免盐对柱子损伤的办法只有降低缓冲盐浓度，使用后充分洗干净柱子，避免纯有机相保存柱子的时候出现问题。此外可用异丙醇冲洗，或二氯甲烷等，一般柱子的说明书上都有处理方式。
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12楼2012-03-22 11:52:07
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xiwenbing

金虫 (初入文坛)
首先，磷酸钾缓冲溶液最好是现配现用；缓冲溶液与有机溶剂配制的流动相会造成单向阀的堵塞，但如果平时在使用完仪器之后，耐心地用甲醇：水=10:90的流动相冲洗1小时左右，就会有效地预防此现象的发生。
    另外，使用含有缓冲盐的流动相前，最好先用水：乙腈=75：25的流动相平衡一下，也可以解决缓冲盐在柱子中析出的问题。
     以上只是个人的一点心得，希望对你有帮助。
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坚持每天学习2小时……
13楼2012-05-10 16:53:45
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sunmaocheng

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
13楼: Originally posted by xiwenbing at 2012-05-10 16:53:45:
首先，磷酸钾缓冲溶液最好是现配现用；缓冲溶液与有机溶剂配制的流动相会造成单向阀的堵塞，但如果平时在使用完仪器之后，耐心地用甲醇：水=10:90的流动相冲洗1小时左右，就会有效地预防此现象的发生。
    另外 ...

谢谢
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Sunshine
14楼2012-05-10 19:02:46
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yugijiang

木虫 (著名写手)
用的时候首先要充分的用不含盐的流动相冲洗，做好之后也得用不含盐的流动相冲洗系统。
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15楼2012-06-25 09:55:44
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qqsheshou

新虫 (初入文坛)
用完后，用甲醇水冲洗泵
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16楼2012-06-25 10:42:21
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hong_31

木虫 (正式写手)
用盐做流动相主要是怕结晶问题对柱子的损坏吧，注意柱子的清洗
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tobeabetterman
17楼2012-06-25 14:54:56
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yugijiang

木虫 (著名写手)
先用不含缓冲盐的流动相冲洗下色谱柱吧，一般20-30倍柱体积就可以了
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18楼2012-07-04 13:20:31
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fannis

金虫 (正式写手)
引用回帖:
11楼: Originally posted by foxcl at 2012-03-21 17:55:32
同意楼上的。

不过
1、关键在于上次用完之后是否冲洗干净。
2、高盐缓冲冲柱子应先用高水相冲洗柱子30min以上（95%的水+5%甲醇/乙腈），再用纯甲醇/乙腈冲洗
3、最后最好不要用纯乙腈结束，乙腈易形成多聚体 ...

那用什么 结束呢
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爱生活爱媳妇儿~
19楼2013-04-16 02:29:31
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resalat61

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
20楼2014-01-17 22:03:55
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