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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 高效液相色谱使用磷酸盐做流动相时应该注意什么
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sunmaocheng

铁虫 (小有名气)

[求助] 高效液相色谱使用磷酸盐做流动相时应该注意什么

柱子是C18，柱子内部是用纯乙腈封的，流动相准备用磷酸钾缓冲液，但是听说磷酸钾缓冲液与有机溶剂容易结晶，容易把机器和柱子堵塞，但是我不知道怎么避免堵塞现象的发生，请懂的人给予帮助。谢谢。
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Sunshine
1楼 2012-03-17 12:21:04
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fisherme

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
sunmaocheng: 金币+3, ★有帮助 2012-03-29 08:48:13
遇到过这样的问题，前一天有人用眼做流动相跑了，系统可能没有冲干净，隔天再用乙腈系统压力就会升高，甚至堵住。这明显是少量盐溶液在系统内有过量的乙腈会洗出盐结晶。
其实只要盐溶液和乙腈比例合适就不会存在析出的问题，关键是使用过后的后处理，也不能直接用100%水来冲，要有个缓冲。算不上经验，交流一下。
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5楼2012-03-17 20:57:37
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sunmaocheng

铁虫 (小有名气)
是不是在跑液相开始的时候，用磷酸钾缓冲液和纯乙腈先梯度洗脱？
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Sunshine
2楼2012-03-17 12:22:46
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huanghaiyu

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
amisking: 金币+3, 鼓励积极应助！ 2012-03-17 16:58:12
sunmaocheng: 金币+3, ★有帮助 2012-03-29 08:47:43
只要盐完全溶解，一般不会有问题的，如果你确实很担心，就把乙腈和盐按照你的比例混合好，然后装在一个瓶子了，再进样品，这样就没问题了，使用完清洗的时候首先要用95%的水冲洗，避免残留。
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3楼2012-03-17 16:53:32
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痴客

木虫 (正式写手)

吃货250

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
sunmaocheng: 金币+3, ★有帮助 2012-03-29 08:47:53
以前用PB缓冲液和乙腈跑过，貌似没出过什么问题，但是后来老师说盐可能会堵柱子
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因为这个世界上这么多的狼，我这只牧羊犬只好放弃我的温顺，向着这个世界放出最耀眼的光。
4楼2012-03-17 18:20:37
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