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sunmaocheng

铁虫 (小有名气)

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[求助] 高效液相色谱使用磷酸盐做流动相时应该注意什么

柱子是C18，柱子内部是用纯乙腈封的，流动相准备用磷酸钾缓冲液，但是听说磷酸钾缓冲液与有机溶剂容易结晶，容易把机器和柱子堵塞，但是我不知道怎么避免堵塞现象的发生，请懂的人给予帮助。谢谢。

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Sunshine

1楼2012-03-17 12:21:04

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痴夷子皮

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【答案】应助回帖

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感谢参与，应助指数 +1
sunmaocheng: 金币+2, ★★★很有帮助 2012-03-29 08:49:00

缓冲盐会析出是因为流动相中有机相（甲醇或乙腈）比例高所致。防止盐析出就需避免高比例有机相-缓冲盐体系的出现。
正规操作
1、以流动相平衡色谱柱前，先用50%~90%以上的水平衡约30min，再更换上流动相。
2、使用后，及时以梯度冲洗色谱柱。80%~90%水 0.5ml/min冲约1h，再改用80%~90%有机相冲约1h，然后以纯乙腈冲及保存。