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sunmaocheng

铁虫 (小有名气)

[求助] 高效液相色谱使用磷酸盐做流动相时应该注意什么

柱子是C18,柱子内部是用纯乙腈封的,流动相准备用磷酸钾缓冲液,但是听说磷酸钾缓冲液与有机溶剂容易结晶,容易把机器和柱子堵塞,但是我不知道怎么避免堵塞现象的发生,请懂的人给予帮助。谢谢。
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Sunshine
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痴夷子皮

版主 (文坛精英)

老痞

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
sunmaocheng: 金币+2, ★★★很有帮助 2012-03-29 08:49:00
缓冲盐会析出是因为流动相中有机相(甲醇或乙腈)比例高所致。防止盐析出就需避免高比例有机相-缓冲盐体系的出现。
正规操作
1、以流动相平衡色谱柱前,先用50%~90%以上的水平衡约30min,再更换上流动相。
2、使用后,及时以梯度冲洗色谱柱。80%~90%水 0.5ml/min冲约1h,再改用80%~90%有机相冲约1h,然后以纯乙腈冲及保存。
守候在风中的宁静。
10楼2012-03-20 09:38:41
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sunmaocheng

铁虫 (小有名气)

是不是在跑液相开始的时候,用磷酸钾缓冲液和纯乙腈先梯度洗脱?
Sunshine
2楼2012-03-17 12:22:46
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huanghaiyu

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
amisking: 金币+3, 鼓励积极应助! 2012-03-17 16:58:12
sunmaocheng: 金币+3, 有帮助 2012-03-29 08:47:43
只要盐完全溶解,一般不会有问题的,如果你确实很担心,就把乙腈和盐按照你的比例混合好,然后装在一个瓶子了,再进样品,这样就没问题了,使用完清洗的时候首先要用95%的水冲洗,避免残留。
3楼2012-03-17 16:53:32
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痴客

木虫 (正式写手)

吃货250

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
sunmaocheng: 金币+3, 有帮助 2012-03-29 08:47:53
以前用PB缓冲液和乙腈跑过,貌似没出过什么问题,但是后来老师说盐可能会堵柱子
因为这个世界上这么多的狼,我这只牧羊犬只好放弃我的温顺,向着这个世界放出最耀眼的光。
4楼2012-03-17 18:20:37
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