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落雪无叶

金虫 (正式写手)


[交流] 免疫印迹

O(∩_∩)O~  有没有做过免疫印迹的  给我说哈经验……谢谢
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andyzhengwp

金虫 (小有名气)


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小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
小丹木木: 金币+5, MolEPI+1, good! 2012-03-16 13:36:01
落雪无叶: 金币+1, O(∩_∩)O~ 谢谢 有什么情况了再请教呢 2012-03-17 21:44:54
1.操作中戴手套,不要用手触膜。
2.PVDF膜在甲醇中浸泡时间不要超过5秒。
3.如检测小于20kD的蛋白应用0.2μm的膜,并可省略转移时的平衡步骤。
4.某些抗原和抗体可被Tween-20 洗脱,此时可用1.0% BSA代替Tween-20。
5.关于封闭剂的选择:5%脱脂奶/TBS or PBS: 能和某些抗原相互作用,掩盖
抗体结合能力;0.3~3% BSA in PBS:低的内源性交叉反应性。
6.如用0. 1% Tween 20、0.02% NaN3 in PBS or TBS作封闭剂和抗体稀释液,抗
体检测后可进行蛋白染色。
7.如要同时检测大分子量和小分子蛋白,最好用梯度胶分离蛋白。
2楼2012-03-16 13:11:38
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