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常用的展开剂
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1、 生物碱 (1)沉淀反应——碘化汞钾试剂 →白色或浅黄色沉淀 碘化铋钾试剂 →橘红色沉淀 碘—碘化钾试剂 →浅棕或暗棕色沉淀 硅钨酸试剂 →浅黄或黄棕色沉淀 磷钨酸试剂 →浅黄色沉淀 磷钼酸试剂 →白色或淡黄色沉淀 苦味酸试剂 →黄色结晶或非结晶形沉淀 鞣酸试剂 →棕黄色沉淀 氯化金试剂 →黄色结晶 氯化铂试剂 →白色结晶 雷氏铵盐 →红色无定形沉淀 (2)薄层层析检查:吸附剂——碱性氧化铝(Ⅲ级,干法铺板) 硅胶G(稀碱湿法铺板) 展开剂——氯仿:甲醇 显色——UV;碘化铋钾 2、 氨基酸、多肽、蛋白质 (1)加热沉淀试验:加热煮沸 →混浊或沉淀 (蛋白质) +5%H2SO4(不加热)→混浊或沉淀 (2)双缩脲反应:+40%NaOH,1%CuSO4 →紫色、红色或紫红色(多肽、蛋白质) (3)茚三酮反应:+0.2%茚三酮试液 →蓝或蓝紫色(氨基酸、多肽、蛋白质) (4)吲哚醌反应:+吲哚醌试液 →各种颜色(氨基酸) (5)Millon反应:+Hg,H2NO2 →红色(蛋白质分子中有酪氨酸组成) (6)Hopkins-Cole反应:+乙醛酸,浓硫酸 →各色(蛋白质分子中有色氨酸组成) (7)氨基酸的薄层层析检查:吸附剂——硅胶G 展开剂—— n-BuOH,n-BuOH:HAc:H2O 显色剂——0.25%茚三酮试液 →紫红色斑点 3、 有机酸 (1)PH试纸检查 (2)溴酚兰试液:喷洒→蓝色背景黄色斑点 (3)薄层层析检查:吸附剂——硅胶G或酸性氧化铝 展开剂—— C6H6:EtOH 显色剂——0.1%溴酚兰试液→黄色 4、 酚类和鞣质 (1)FeCl3试剂:+1%FeCl3试液 →蓝、暗绿或蓝紫色 (2)三氯化铁-铁氰化钾试剂:喷洒→蓝色斑点 (3)香草醛-盐酸试剂:喷洒 →红色(间苯二酚、间苯三酚) (4)重氮盐试剂:+对硝基苯胺、亚硝酸钠 →红色 (5)薄层层析检查:吸附剂——硅胶G或纤维素 展开剂—— n-BuOH:HAc:H2O;15%HAc 显色剂——1% FeCl3试液 1%三氯化铁-1%铁氰化钾试液 →蓝、绿或黑色 鞣质与酚类的区别:+明胶 —— 沉淀 上清液 +1%FeCl3试液 →蓝、暗绿或蓝紫色 5、 糖和苷 (1)斐林试剂:+硫酸铜、酒石酸钾钠 —— 砖红色沉淀(还原糖) (—)+1%HCl +NaOH 沉淀(苷元) △30min 上清液(+)(多糖、苷) (2)Molish反应:+α-萘酚-浓硫酸 →紫红色环 (3)银镜反应:+0.1N硝酸银、5N氨水 →银褐色(还原糖) (4)薄层层析检查::吸附剂——硅胶G或纤维素 展开剂—— n-BuOH:Pd:H2O;15%HAc 显色剂—— 苯胺-邻苯二甲酸 6、 皂苷 (1)泡末试验:振摇 →大量持续性泡末 +0.1M HCl 二管泡末高度相同(三萜皂苷) +0.1M NaOH 碱管高于酸管(甾体皂苷) (2)溶血试验:+2%红血球悬浮液 →溶血 (3)Lieberman—Burchard反应:+醋酐-浓硫酸—— 紫红色(三萜皂苷) 黄-红-紫-污绿(甾体皂苷) 7、甾体 (1)Lieberman—Burchard反应:+醋酐-浓硫酸 →黄-红-紫-污绿 (2)氯仿-浓硫酸反应:+氯仿-浓硫酸 氯仿层→红或青色 硫酸层→绿色荧光 (3)五氯化锑或三氯化锑反应:+SbCl3或SbCl5 →红色 (4)薄层层析检查:吸附剂——中性氧化铝或硅胶G 展开剂—— C6H6-MeOH;CHCl3-MeOH 显色剂—— 10%磷钼酸 →蓝-蓝紫色 5%三氯化锑试液 →红、棕红或绿色 8、黄酮 (1)盐酸-镁粉反应:+HCl-Mg →红色 (2)三氯化铝反应:+AlCl3 →黄色 (3)浓氨水反应:+NH3 →亮黄或橙色 (4)薄层层析检查:吸附剂——聚酰胺或硅胶G 展开剂—— MeOH-H2O;EtOH-H2O 显色剂—— UV→亮黄或黄绿色荧光 1%三氯化铝试液→亮黄色 9、香豆素、内酯 (1)开闭环反应:+1%NaOH→澄清 +2%HCl→混浊 (2)异羟污酸铁反应:+7%盐酸羟胺、10%KOH △ +稀HCl、1%FeCl3 →红色 (3)重氮盐试剂:+对硝基苯胺、亚硝酸钠 →红色 (4)薄层层析检查:吸附剂——酸性硅胶G或硅胶G 或酸性氧化铝 展开剂—— 甲苯-乙酸乙酯-甲酸(5:4:1) 显色剂—— UV→蓝色荧光 异羟污酸铁试液 →红色 10、强心苷 (1)Kedde试剂:+3,5-二硝基苯甲酸试液 →紫红色 (2)Baljet试剂:+碱性苦味酸试液 →橙或橙红色 (3)Legal试剂:+亚硝酰铁氰化钠试液 →紫红色 (4)K-K反应:+FeCl3/冰HAc、浓H2SO4→ 上层绿~蓝色 (2-去氧糖) 界面红棕色 (5)薄层层析检查:吸附剂——硅胶G 或中性氧化铝 展开剂—— n-BuOH:HAc:H2O(4:1:5) 显色剂—— 碱性3,5-二硝基苯甲酸试液→紫红色 碱性苦味酸试液 →橙红色 11、蒽醌 (1)碱液反应:+10%NaOH →红色 +H2O2 →红色不褪 +H+ →红色褪去 (2)醋酸镁反应:+1%MgAc2 →红色 (3)薄层层析检查:吸附剂——硅胶G 展开剂——Pet:EtOAc 显色剂—— UV→黄色荧光 5%NaOH →红色 12、挥发油、油脂 (1)油斑检查:油斑挥发 →挥发油; 油斑不消失→油脂或类脂 (2)磷钼酸反应:喷洒5%磷钼酸试液 →蓝色(油脂、三萜、甾醇) |
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