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swaucq

金虫 (正式写手)

[求助] 水溶性组分的分离纯化 已有1人参与

我的一个微生物发酵样品,从中压反向RP-18柱30%甲醇组分下来的,再过了一次中压反向后,合并分到一个组分,只溶于水,不溶于甲醇,丙酮,乙酸乙酯,但是TLC板上用氯仿:甲醇20:1展层有主点,而且Rf值0.6左右。怀疑是糖苷类的东西。请各位虫友支个招,下一步怎么分离纯化比较好?
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不卑不亢
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hinge1001

银虫 (小有名气)


【答案】应助回帖

水溶性较大的物质,既然你已经使用反相了,就试试亲水的C18吧,对水溶性好的物质保留较强,可能比普通的C18效果会好
8楼2012-05-29 09:53:59
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anyluk

主管区长 (文坛精英)

国家高级公共营养师

优秀区长优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
swaucq(金币+1): ★★★很有帮助 2012-03-12 13:04:51
jiangchunyong(金币+1): 谢谢 2012-03-12 14:16:18
20:1能展开,,

你说说哦的不溶于乙酸乙酯,丙酮,甲醇?

这个成分有很大的疑问,

HPLC检测过没?

糖苷类的
那就继续反相分离,
从5%甲醇-40%,梯度继续洗脱
精益求精
2楼2012-03-12 12:23:44
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jiyannangxj

至尊木虫 (著名写手)

美女搞科研

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
leecius(金币+1): 谢谢参与。 2012-03-14 08:26:02
我也是做微生物发酵分离的,昨天刚刚发酵结束,抽滤后,菌丝体与发酵液分离了,发酵清液大约有80L,请问你是如何浓缩发酵液的,是通过旋蒸浓缩水,还是直接用乙酸乙酯萃取三次的啊…我想浓缩到20L再萃取,不知道那种方法,简便快捷…急,求解……

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
3楼2012-03-14 01:07:43
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匿名

用户注销 (文坛精英)



leecius(金币+1): 谢谢。 2012-03-14 08:26:07
本帖仅楼主可见
4楼2012-03-14 05:49:31
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