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swaucq

金虫 (正式写手)

[求助] 水溶性组分的分离纯化 已有1人参与

我的一个微生物发酵样品,从中压反向RP-18柱30%甲醇组分下来的,再过了一次中压反向后,合并分到一个组分,只溶于水,不溶于甲醇,丙酮,乙酸乙酯,但是TLC板上用氯仿:甲醇20:1展层有主点,而且Rf值0.6左右。怀疑是糖苷类的东西。请各位虫友支个招,下一步怎么分离纯化比较好?
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jiyannangxj

至尊木虫 (著名写手)

美女搞科研

引用回帖:
6楼: Originally posted by swaucq at 2012-03-15 15:57:51:
哦,我是用固体发酵的。直接浸泡,萃取,旋蒸。

那你可是有福了,没有水,我这全是水相啊,80L啊,旋蒸不是办法,而且容易破坏化合物结构,我就只有硬萃取了。。。。不过每次萃取 ,几乎都没有颜色啊,唉,水相颜色深的很啊。。。。。。。。。。。。。。。。可惜了。。。。
7楼2012-03-15 17:34:48
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anyluk

主管区长 (文坛精英)

国家高级公共营养师

优秀区长优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
swaucq(金币+1): ★★★很有帮助 2012-03-12 13:04:51
jiangchunyong(金币+1): 谢谢 2012-03-12 14:16:18
20:1能展开,,

你说说哦的不溶于乙酸乙酯,丙酮,甲醇?

这个成分有很大的疑问,

HPLC检测过没?

糖苷类的
那就继续反相分离,
从5%甲醇-40%,梯度继续洗脱
精益求精
2楼2012-03-12 12:23:44
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jiyannangxj

至尊木虫 (著名写手)

美女搞科研

【答案】应助回帖

★
感谢参与,应助指数 +1
leecius(金币+1): 谢谢参与。 2012-03-14 08:26:02
我也是做微生物发酵分离的,昨天刚刚发酵结束,抽滤后,菌丝体与发酵液分离了,发酵清液大约有80L,请问你是如何浓缩发酵液的,是通过旋蒸浓缩水,还是直接用乙酸乙酯萃取三次的啊…我想浓缩到20L再萃取,不知道那种方法,简便快捷…急,求解……

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
3楼2012-03-14 01:07:43
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匿名

用户注销 (文坛精英)


★
leecius(金币+1): 谢谢。 2012-03-14 08:26:07
本帖仅楼主可见
4楼2012-03-14 05:49:31
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