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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 质粒转化完 传代后发现变小 再传一代质粒直接消失了
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ououcao

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
judy520(金币+3): ★★★很有帮助 2012-03-10 16:45:02
因为你挑的单菌落里既有你转化的有你的质粒的菌落，也有只转了抗性基因的菌落。而有质粒的细菌长得不如只转了抗性基因的菌落，所以当你扩大培养时多传几代后质粒就会减少。因为大部分菌都是没有质粒转入的啦。
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11楼2012-03-09 11:00:07
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judy520

金虫 (小有名气)
引用回帖:
楼: Originally posted by ououcao at 2012-03-09 11:00:07:
因为你挑的单菌落里既有你转化的有你的质粒的菌落，也有只转了抗性基因的菌落。而有质粒的细菌长得不如只转了抗性基因的菌落，所以当你扩大培养时多传几代后质粒就会减少。因为大部分菌都是没有质粒转入的啦。

这样也很有可能的 那我把以前保的菌经过多次划线纯化 可能能找回我的转化菌
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敢于开始
12楼2012-03-10 16:44:50
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克隆大虾

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
judy520: 金币+3, ★★★很有帮助, 很好的思路 2012-03-22 16:58:28
可以把PUZ8002转化进DH5a，进行接合转移，效率低点，但是对于一些模式菌足够了.
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13楼2012-03-20 19:04:54
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食毕莫饥

铁虫 (初入文坛)
顶一下 我朋友也出现这个问题
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14楼2012-03-21 15:05:39
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judy520

金虫 (小有名气)
引用回帖:
13楼: Originally posted by 克隆大虾 at 2012-03-20 19:04:54:
可以把PUZ8002转化进DH5a，进行接合转移，效率低点，但是对于一些模式菌足够了.

是个好办法 这个思路以前没有想过 不过我的菌不是模式菌 用ET接合子就很少了 做起来很勉强
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敢于开始
15楼2012-03-22 16:59:43
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