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@@xiaowu@@

铜虫 (初入文坛)

[求助] pcr-DGGE

细菌 引物338F 518R
pcr之后DGGE 银染 砌胶 回收 再pcr
这是DGGE之后pcr的结果 我做了很长时间
都是这样的结果 什么原因呀 怎么改进呀
请各位大侠帮一下
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1楼 2012-03-01 08:08:14
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叮叮0504

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
rainwander(金币+1): 鼓励交流 2012-03-04 10:03:44
有可能是银染得问题，可以改变染色的方法，我们用SYBR GREEN染色，不会出现你这种情况。
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2楼2012-03-01 08:50:56
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@@xiaowu@@

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
楼: Originally posted by 叮叮0504 at 2012-03-01 08:50:56:
有可能是银染得问题，可以改变染色的方法，我们用SYBR GREEN染色，不会出现你这种情况。

用SYBR GREEN染色
怎么做呀
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3楼2012-03-01 11:09:21
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彼岸花开V

至尊木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
传张PCR电泳图和DGGE电泳参数看看，如果PCR和DGGE电泳控制好的话，用EB染色都很清晰
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4楼2012-03-01 13:00:47
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zhaojin2399

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by @@xiaowu@@ at 2012-03-01 11:09:21:
用SYBR GREEN染色
怎么做呀

按1：10000的比例稀释于1*TAE里，涂布于DGGE胶上，避光染色30min,用去离子水冲洗后，拍照切胶。
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5楼2012-03-01 13:02:18
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caisanrenju

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
rainwander(金币+1): 鼓励交流 2012-03-04 10:04:00
银染一般不用来切胶回收，同样建议用sybr Green
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6楼2012-03-02 12:11:46
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宝杰罗生物

捐助贵宾 (小有名气)
不是染色问题，是你PCR和DGGE跑胶的问题。
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7楼2012-03-02 12:24:21
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@@xiaowu@@

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
楼: Originally posted by 宝杰罗生物 at 2012-03-02 12:24:21:
不是染色问题，是你PCR和DGGE跑胶的问题。

那么 您是怎么做的呀 能指教一下么
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8楼2012-03-04 08:20:36
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天鸟

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
rainwander(金币+2): 鼓励交流 2012-03-04 10:04:18
你的dgge图呀，都可以拿出来看看了，上DGGE前的PCR产物的图怎么样呀
这些也是关键的信息的呀，我们是直接切胶后，放在40微升水中，4度过夜就肯定能再次PCR出来的
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快乐生活，我快乐
9楼2012-03-04 08:59:40
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