24小时热门版块排行榜    

查看: 1090  |  回复: 8

@@xiaowu@@

铜虫 (初入文坛)

[求助] pcr-DGGE

细菌 引物338F 518R
pcr之后DGGE 银染 砌胶 回收 再pcr
这是DGGE之后pcr的结果 我做了很长时间
都是这样的结果 什么原因呀 怎么改进呀
请各位大侠帮一下
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

叮叮0504

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
rainwander(金币+1): 鼓励交流 2012-03-04 10:03:44
有可能是银染得问题,可以改变染色的方法,我们用SYBR GREEN染色,不会出现你这种情况。
2楼2012-03-01 08:50:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

@@xiaowu@@

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
: Originally posted by 叮叮0504 at 2012-03-01 08:50:56:
有可能是银染得问题,可以改变染色的方法,我们用SYBR GREEN染色,不会出现你这种情况。

用SYBR GREEN染色
怎么做呀
3楼2012-03-01 11:09:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

彼岸花开V

至尊木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
传张PCR电泳图和DGGE电泳参数看看,如果PCR和DGGE电泳控制好的话,用EB染色都很清晰
4楼2012-03-01 13:00:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhaojin2399

金虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by @@xiaowu@@ at 2012-03-01 11:09:21:
用SYBR GREEN染色
怎么做呀

按1:10000的比例稀释于1*TAE里,涂布于DGGE胶上,避光染色30min,用去离子水冲洗后,拍照切胶。
5楼2012-03-01 13:02:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

caisanrenju

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
rainwander(金币+1): 鼓励交流 2012-03-04 10:04:00
银染一般不用来切胶回收,同样建议用sybr Green
6楼2012-03-02 12:11:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

宝杰罗生物

捐助贵宾 (小有名气)


不是染色问题,是你PCR和DGGE跑胶的问题。
7楼2012-03-02 12:24:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

@@xiaowu@@

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
: Originally posted by 宝杰罗生物 at 2012-03-02 12:24:21:
不是染色问题,是你PCR和DGGE跑胶的问题。

那么 您是怎么做的呀 能指教一下么
8楼2012-03-04 08:20:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

天鸟

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
rainwander(金币+2): 鼓励交流 2012-03-04 10:04:18
你的dgge图呀,都可以拿出来看看了,上DGGE前的PCR产物的图怎么样呀
这些也是关键的信息的呀,我们是直接切胶后,放在40微升水中,4度过夜就肯定能再次PCR出来的
快乐生活,我快乐
9楼2012-03-04 08:59:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 学员18LpGo 的主题更新
信息提示
请填处理意见