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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » DIG试剂盒中的DNA稀释液如何配置？
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vickie20

铜虫 (小有名气)

[求助] DIG试剂盒中的DNA稀释液如何配置？

实验室买了DIG DNA Labling and Detection Kit(cat. No. 11 093 657 910 ), 其中的DNA稀释液用完想再自己配，但是不知道如何配置，求各位帮忙:tiger06NA稀释液的组分：50μg/ml herring sperm DNA, 10mM Tris-HCl, 1mM EDTA, pH8.0
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1楼 2012-02-29 09:08:49
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eagle00768

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
1949stone(金币+1): 鼓励 2012-02-29 19:20:16
我也准备要用到这个试剂盒了，还没订呢。楼主订的是罗氏的吗？鲱鱼精DNA（好像是有见这么个写法），这个得单买吧？后边那两个应该都不难阿，按照分子量去称取配制就可以了
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2楼2012-02-29 09:17:32
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longrna

新虫 (正式写手)
稀释液组分？按其浓度配不就完事了？
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伟大航线....
3楼2012-02-29 09:21:34
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vickie20

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
楼: Originally posted by eagle00768 at 2012-02-29 09:17:32:
我也准备要用到这个试剂盒了，还没订呢。楼主订的是罗氏的吗？鲱鱼精DNA（好像是有见这么个写法），这个得单买吧？后边那两个应该都不难阿，按照分子量去称取配制就可以了

我用的是罗氏，鲱鱼精DNA不用单买，试剂盒里带，但是只有2ml，检测探针标记效果对我来说不够用，所以想自己配，主要是看到杂交液里鲑鱼精DNA这一组分配制的步骤挺麻烦，所以就考虑是不是鲱鱼精DNA的配制没这么简单
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4楼2012-02-29 10:11:50
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vickie20

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
楼: Originally posted by longrna at 2012-02-29 09:21:34:
稀释液组分？按其浓度配不就完事了？

要是这么简单就好了，我想知道配这个稀释液鲱鱼精DNA要不要其他处理，比如煮沸变性，比如酚氯仿抽提，比如膜过滤……
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5楼2012-02-29 10:14:56
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longrna

新虫 (正式写手)
咨询一下Roche技术支持看看...
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伟大航线....
6楼2012-02-29 10:17:28
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vickie20

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
楼: Originally posted by longrna at 2012-02-29 10:17:28:
咨询一下Roche技术支持看看...

已经发邮件了，还没回复，有点着急先上这里问问，呵呵
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7楼2012-02-29 10:18:41
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laokei

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
是鲑鱼精DNA，不是鲱鱼精DNA；买配好的就好了，拿来稀释就可以了；这个东西在杂交中有干扰！
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8楼2012-02-29 12:45:13
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vickie20

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
楼: Originally posted by laokei at 2012-02-29 12:45:13:
是鲑鱼精DNA，不是鲱鱼精DNA；买配好的就好了，拿来稀释就可以了；这个东西在杂交中有干扰！

是鲱鱼精DNA（herring sperm DNA），不是鲑鱼精DNA（salmon sperm DNA）我买到的是粉末状的
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9楼2012-03-01 11:23:57
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Trista`

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by laokei at 2012-02-29 12:45:13
是鲑鱼精DNA，不是鲱鱼精DNA；买配好的就好了，拿来稀释就可以了；这个东西在杂交中有干扰！

是不是在酵母转化过程中，应该用的ssDNA是鲑鱼精的 ，那为什么鲱鱼精的不可用呢？请大神指教
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结交优秀的人
10楼2013-03-30 16:51:47
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