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zhoulir7

新虫 (初入文坛)

[求助] 发酵液中活性成分分离的相关问题

各位虫友,本人目前正在做发酵液中生物活性物质的提取和分离工作,我的思路是先提取,再用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取,看哪一部分的活性最高,现在的结果是水相的活性最高,其次是乙酸乙酯相和正丁醇相,石油醚相几乎没有活性。第一个问题:现在不知道下一步该怎么做,过柱子的话工作量会相当大,而且我也不能确定我要的东西确实存在于水相还是因为萃取不完全,水相残留的多。另一个问题是:我将PH为4的粗发酵液,中和后就没有活性了,我想先排除一下目标物是不是有机酸,如何排除?谢谢大家!
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留级生2005

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
首先你应该确定所谓活性特指什么活性抗氧化?抗肿瘤?还是具有其他什么活性,然后应该对活性物质的基本性质进行研究,在探索分离纯化手段。仅提供了一条思路,如果有具体的条件就好办了。祝好运!!!
2楼2012-02-29 10:07:40
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zhoulir7

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
: Originally posted by 留级生2005 at 2012-02-29 10:07:40:
首先你应该确定所谓活性特指什么活性抗氧化?抗肿瘤?还是具有其他什么活性,然后应该对活性物质的基本性质进行研究,在探索分离纯化手段。仅提供了一条思路,如果有具体的条件就好办了。祝好运!!!

谢谢,活性是抗氧化,分离纯化也试过用按分子量不同分级的方法,经过透析处理,确定是分子量小于3500的物质。另外根据对粗发酵液基本特性的分析发现是一种热稳定性物质,可以排除蛋白质。目前就得到这些信息。不知道您有没有什么好的建议,万分感谢!
3楼2012-02-29 18:52:04
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留级生2005

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
zhoulir7(金币+5): 有帮助 2012-03-06 17:47:35
1.首先需要确定纯度,做薄层检测或色谱分析其纯度
2.做紫外-可见光谱,由其特征峰初步对其定性,是什么物质
3.尽量对其进行结晶处理
4.有了晶体,就好办了,想知道什么就可以知道什么,包括论文SCI,IF.>3的
4楼2012-02-29 23:12:00
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