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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 大家做水浴摇床培养的时候怎么避免杂菌污染的？
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nanonewman

木虫 (小有名气)

[求助] 大家做水浴摇床培养的时候怎么避免杂菌污染的？

不好意思又要向大家求助了。我最近在做一种好氧菌培养，在摇床上37度200转的速度下进行培养，结果发现有两管作为基准对比的营养液被杂菌污染了，本来应该是澄清的液体在6d后出现浑浊，镜检发现有大量杂菌。我发现所有试管上塞的棉花塞都完全是饱水的，估计是摇床盖子上的冷凝水滴下来所致，这样岂不是所有的样本都被污染？我想问在这种情况下是不是要再加一个防水的盖子呢，可是加上了会不会又导致透气性不良？
另外，我又在想会不会是营养液本身没有灭菌完全，我是在高压灭菌器里121度下灭菌20min处理的，不过当时基准营养液在锥形瓶里装的比较满，250ml的容量我装了近200ml，这个会不会导致灭菌不彻底？
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1楼2012-02-17 18:06:26
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匿名

用户注销 (知名作家)
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15楼2012-02-18 15:41:04
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sdmissing

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可能是灭菌不彻底吧，200ml/250ml的装量.....太大了
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2楼2012-02-17 18:12:45
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nanonewman

木虫 (小有名气)
引用回帖:
楼: Originally posted by sdmissing at 2012-02-17 18:12:45:
可能是灭菌不彻底吧，200ml/250ml的装量.....太大了

那250ml一般装多少比较合适？
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3楼2012-02-17 18:15:03
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virty76

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

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加多孔硅胶塞吧，水不浸润
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nanonewman
4楼2012-02-17 20:58:52
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匿名

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zhang8826857(金币+1): 鼓励交流 2012-02-18 10:13:54
nanonewman(金币+5): ★★★很有帮助 金币给你 2012-02-18 14:12:00
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5楼2012-02-17 20:59:51
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pamela9838

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
一般摇床不是可以设定温度的吗？再说你放这么满的培养基会不会是在摇床过程中培养基摇到棉塞上了呢？
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6楼2012-02-17 21:27:56
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nanonewman

木虫 (小有名气)
引用回帖:
楼: Originally posted by shangyukuan at 2012-02-17 20:59:51:
250ml一般装<100ml，水浴摇床？摇床为什么要水浴呢，不是有空气浴吗？"试管上塞的棉花塞........基准营养液在锥形瓶里",建议你用都用锥形瓶，与试管相比向心力、溶解氧等一些参数还是用不同的，另外 ...

准确说是水浴恒温振荡器，不过我们这台没有防止水凝的装置，就是上面一个拱形的盖子，虽然水可以顺着拱形坡面流，但不可避免的还是有部分会滴在试管上
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7楼2012-02-17 21:33:56
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nanonewman

木虫 (小有名气)
引用回帖:
楼: Originally posted by pamela9838 at 2012-02-17 21:27:56:
一般摇床不是可以设定温度的吗？再说你放这么满的培养基会不会是在摇床过程中培养基摇到棉塞上了呢？

是设定的温度，37度。在摇床培养的时候培养基已经分装到试管里了，没有再用锥形瓶
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8楼2012-02-17 21:35:06
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nanonewman

木虫 (小有名气)
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引用回帖:
楼: Originally posted by virty76 at 2012-02-17 20:58:52:
加多孔硅胶塞吧，水不浸润

是么，我看很多都说用透气硅胶塞好，但有些又说硅胶塞透气性不如纱布或棉塞，只适合用于菌株保藏，不适合培养。另外，假如用硅胶塞，灭菌的时候还需不需要像用纱布或棉塞一样外面再包一层牛皮纸？
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9楼2012-02-17 21:38:08
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pamela9838

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
9楼: Originally posted by nanonewman at 2012-02-17 21:38:08:
是么，我看很多都说用透气硅胶塞好，但有些又说硅胶塞透气性不如纱布或棉塞，只适合用于菌株保藏，不适合培养。另外，假如用硅胶塞，灭菌的时候还需不需要像用纱布或棉塞一样外面再包一层牛皮纸？

灭菌时要包的，要不然那个胶塞很容易就顶开了
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10楼2012-02-17 21:50:18
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