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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » E.coli离心离不下来
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gongeleven

铁杆木虫 (正式写手)

[交流] E.coli离心离不下来

用来做plasmid Maxiprep， 200ml菌液，结果4700rpm 15min离不下来，一起离心的其他菌都下来了。后来放1.5管子里13000rpm离心后看起来也不正常。
有人说菌死了。。不能做大抽了。
从来没遇到过这种问题。。。
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1楼 2012-02-15 10:32:37
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necilyx

金虫 (正式写手)
★
gongeleven(金币+1):谢谢参与
菌体是不是自溶了啊~~
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2楼2012-02-15 13:04:19
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wjswj

木虫 (正式写手)
★
gongeleven(金币+1):谢谢参与
楼上说的对呀！可以镜检一下下，看看细菌是不是正常。培养基没问题的话就是细菌的问题了
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3楼2012-02-15 13:27:39
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gongeleven

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
楼: Originally posted by necilyx at 2012-02-15 13:04:19:
菌体是不是自溶了啊~~

一般什么原因会造成这种结果呢？
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4楼2012-02-16 09:25:18
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necilyx

金虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by gongeleven at 2012-02-16 09:25:18:
一般什么原因会造成这种结果呢？

一般来说能够引起菌体自溶的原因很多，比如培养基的不好，菌体传代次数太多菌体太老，或者操作不当，等等，很难说具体可能是什么原因总之可以分为三部分，菌体，培养基及培养条件，再就是操作，楼主可以逐一排查看看～～祝好运～
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5楼2012-02-16 19:50:01
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若水5886

新虫 (小有名气)
★
gongeleven(金币+1):谢谢参与
是不是感染了噬菌体呢?
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6楼2012-02-17 11:07:05
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gongeleven

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
楼: Originally posted by 若水5886 at 2012-02-17 11:07:05:
是不是感染了噬菌体呢?

是有可能，隔壁组遇到过这个问题，而且我们确实有个组在做噬菌体。看来以后不能那么粗犷了
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7楼2012-02-17 12:48:18
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若水5886

新虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by gongeleven at 2012-02-17 12:48:18:
是有可能，隔壁组遇到过这个问题，而且我们确实有个组在做噬菌体。看来以后不能那么粗犷了

去除噬菌体污染方法：玻璃和金属器皿200度干烤4h。塑料器皿用1%（w/v）次氯酸钠浸泡30min后用去离子水洗净。真的是噬菌体污染的话要先好好处理一下了
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9楼2012-02-17 16:51:19
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clarktao8楼
2012-02-17 12:50   回复  
gongeleven(金币+1):谢谢参与
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