24小时热门版块排行榜    

查看: 2328  |  回复: 13

zhiqiang5070

木虫 (正式写手)

引用回帖:
: Originally posted by whb21 at 2012-02-08 14:51:52:
IPTG诱导不出来目标蛋白很有可能是质粒载体构建出了问题,不知道你IPTG加入量多少,但个人觉得IPTG诱导能力超强,只要加进去就会诱导出蛋白,SDS-PAGE上就会有条带。建议你从上游查起。祝好运

我的载体为T7lac,IPTG又到浓度为1mM。上游检查无问题啊
无善无恶心之体
11楼2012-02-10 09:49:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhiqiang5070

木虫 (正式写手)

引用回帖:
: Originally posted by cnliu51 at 2012-02-09 10:55:08:
这种问题我曾经遇到过,反复构建了两次表达载体,均没有表达出来。经过核实,认为问题出在基因的密码子使用偏好上,后来我们按照大肠菌的密码使用偏好设计了基因,全人工合成了该基因,结果就表达出来了。希望我的 ...

应该花了很长时间吧,我的时间可能不够
无善无恶心之体
12楼2012-02-10 09:50:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

whb21

木虫 (著名写手)

还有可以看看阅读框架和His-Tag有没有问题,要是没问题的话就真不好说了
13楼2012-02-12 08:27:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiuluokemo

铜虫 (初入文坛)

你用什么酶连接的。测序的结果比对一下酶切连接时有没有对载体上的核糖体识别位点构成破坏。建议用合适的酶切位点,如果没问题就重新再连接一次,怀疑核糖体识别位点遭到破坏。
或者严重的是你这个东西大量在大肠杆菌体内表达是由毒性的,那你就悲剧了.
没有做不了的事,只有下不了的决心
14楼2012-02-24 21:11:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 zhiqiang5070 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 352求调剂 +3 大米饭! 2026-03-22 3/150 2026-03-22 23:28 by king123!
[考研] 0854电子信息求调剂 +3 α____ 2026-03-22 3/150 2026-03-22 21:28 by zhq0425
[考研] 315分,诚求调剂,材料与化工085600 +3 13756423260 2026-03-22 3/150 2026-03-22 20:11 by edmund7
[考研] 求调剂 +6 十三加油 2026-03-21 6/300 2026-03-22 17:00 by i_cooler
[考研] 333求调剂 +5 87639 2026-03-21 7/350 2026-03-21 19:31 by ColorlessPI
[考研] 求调剂 +3 .m.. 2026-03-21 4/200 2026-03-21 16:25 by barlinike
[考研] 南昌大学材料专硕311分求调剂 +6 77chaselx 2026-03-20 6/300 2026-03-21 07:24 by JourneyLucky
[考研] 307求调剂 +3 wyyyqx 2026-03-17 3/150 2026-03-21 03:20 by JourneyLucky
[考研] 083200学硕321分一志愿暨南大学求调剂 +3 innocenceF 2026-03-17 3/150 2026-03-21 02:35 by JourneyLucky
[考研] 271材料工程求调剂 +8 .6lL 2026-03-18 8/400 2026-03-21 00:58 by JourneyLucky
[考研] 308求调剂 +3 阿姐阿姐家啊 2026-03-18 3/150 2026-03-20 23:24 by JourneyLucky
[考研] 考研调剂求学校推荐 +3 伯乐29 2026-03-18 5/250 2026-03-20 22:59 by JourneyLucky
[考研] A区线材料学调剂 +5 周周无极 2026-03-20 5/250 2026-03-20 21:33 by laoshidan
[考研] 一志愿西安交通大学 学硕 354求调剂211或者双一流 +3 我想要读研究生 2026-03-20 3/150 2026-03-20 20:13 by JourneyLucky
[考研] 0856调剂,是学校就去 +8 sllhht 2026-03-19 9/450 2026-03-20 14:25 by 无懈可击111
[考研] 招收调剂硕士 +4 lidianxing 2026-03-19 12/600 2026-03-20 12:25 by lidianxing
[考研] 材料考研调剂 +3 xwt。 2026-03-19 3/150 2026-03-19 11:22 by w沐阳w
[考研] 收复试调剂生 +4 雨后秋荷 2026-03-18 4/200 2026-03-18 14:16 by elevennnne
[考博] 26申博 +4 八6八68 2026-03-16 4/200 2026-03-17 13:00 by 轻松不少随
[考研] 333求调剂 +3 文思客 2026-03-16 7/350 2026-03-16 18:21 by 文思客
信息提示
请填处理意见