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peifeinini

铜虫 (正式写手)

[求助] 关于样品在buffer里的形态问题的困扰

大家都知道,如果分析物HAc是弱酸,则当buffer的pHpKa时,以Ac-形式存在。



我目前同时分离20种东西,其中有几种种分析物的pKa正好等于或接近于buffer的pH,所以我怀疑我目前得到的谱图中会有几对峰是分别属于这几种分析物的(也就是一种样有两个峰)。同时,有可能有些样的另外一种形态的峰跟其他物质的峰重叠在一起没有分开。有没有人遇到过这样的情况?如何解决?
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风轻轻的吹

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
peifeinini(金币+5): ★★★很有帮助 2012-02-01 14:27:00
当分析物的pKa接近缓冲液的pH值时,理论上分析物是以两种形态存在,但你在色谱分离过程中是得不到这两种形态的峰的,因为你不光要考虑化合物的热力学性质,还需要考虑到化合物的动力学性质,当两种形态共存时,实际上并不是静态的,而是在不断地进行着可逆反应,当可逆反应的速率远远大于分离速率时,化合物的两种形态仍然保持平衡,那么分离得到的峰仍表现为一个色谱峰,并且同时包含两种形态的信息。
    建议你可以进单标进行验证。
2楼2012-02-01 12:34:18
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peifeinini

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
楼: Originally posted by 风轻轻的吹 at 2012-02-01 12:34:18:
当分析物的pKa接近缓冲液的pH值时,理论上分析物是以两种形态存在,但你在色谱分离过程中是得不到这两种形态的峰的,因为你不光要考虑化合物的热力学性质,还需要考虑到化合物的动力学性质,当两种形态共存时,实 ...

非常有道理,同意你的观点,再进一步用实验验证就知道了。非常感谢!
3楼2012-02-01 13:35:46
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