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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 酶活实验
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zxhong

金虫 (正式写手)

[求助] 酶活实验

作酶活实验，是否需要做West blot或定量PCR试验，如何进行较好？
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1楼 2012-01-13 10:29:02
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qaz20021

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
zxhong: 回帖置顶 2012-01-18 14:08:16
问得太笼统，测酶活的方法很多，WB一般只能半定量，最好选用可以定量的方法，要看你做的是什么酶了。
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2楼2012-01-17 16:14:17
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普通回帖

zxhong

金虫 (正式写手)
引用回帖:
楼: Originally posted by qaz20021 at 2012-01-17 16:14:17:
问得太笼统，测酶活的方法很多，WB一般只能半定量，最好选用可以定量的方法，要看你做的是什么酶了。

定量的方法有哪些？一般测酯酶、POD、SOD、乙酰胆碱酯酶、P450等，哪些方法测得结果可发比较高级的杂志上（国家级以上）。
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3楼2012-01-18 14:07:46
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qaz20021

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

这些方法你网上都可以查到的（记得SOD可以用吸光度方法，AcE可以用荧光底物法），常用的合理的方法发文章都可以用的啦，你也可以参考一下别人做相关实验所采用的方法。
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4楼2012-01-18 15:13:08
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zxhong

金虫 (正式写手)
引用回帖:
楼: Originally posted by qaz20021 at 2012-01-18 15:13:08:
这些方法你网上都可以查到的（记得SOD可以用吸光度方法，AcE可以用荧光底物法），常用的合理的方法发文章都可以用的啦，你也可以参考一下别人做相关实验所采用的方法。

我用的底物染色法（及普通的酶染色法），但发文章时专家不是提出让用Wb法，就是让用定量PCR法，不知下步试验该如何进行？望指点！
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5楼2012-01-18 16:25:29
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qaz20021

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

发文章的话，你可以用一种定量的方法，然后再用WB的方法定性一下，毕竟WB结果直接明白，发文章好用，我的意思是你两个方法都用。
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6楼2012-01-19 10:21:16
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zxhong

金虫 (正式写手)
麻烦告知那种定量的方法？我经费有限，WB做起来都困难。
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7楼2012-01-21 22:02:29
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