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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » 总皂苷的测定
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林下之夕

铜虫 (小有名气)

[求助] 总皂苷的测定 已有1人参与

最近按比色法用紫外做总皂苷的含量测定，测定的吸光度偏高，竟然样品比对照品要高，样品是2.555，对照是1.636.测了几次都是如此，换了个人做刚好值是相反的。显色剂是5%香草醛-冰乙酸0.2ml,高氯酸0.8ml.不知道原因在哪里，怀疑是显色有问题。有哪位高人指点下，显色时应该注意什么，他们的显色原理是什么。显色时颜色变化很复杂。
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1楼 2011-12-22 15:37:07
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Allytang

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

你的步骤是怎么样的啊？具体的应该要稀释很多倍的，我的样品是旋干用甲醇溶解再稀释，定容到50ml容量瓶中。取1ml然后添加是5%香草醛-冰乙酸0.2ml,高氯酸0.8ml,然后60℃保持15分钟，流水冷却之后 加入5ml冰乙酸进行测定。
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6楼2012-11-29 10:59:17
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zengzhen2210

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
xiaoxiao270(金币+2): 谢谢 2011-12-22 21:16:16
吸光度值应该在0.1-0.9之间较好，严格一点说0.2-0.7。你超出范围太多，值已经不准了。你取的样品与对照品应相应少一点，大概是现在的1/4或1/3。我记得这个反应是先显色，后加冰乙酸稀释的，原理是高氯酸使皂苷的结构变成共轭的，与香草醛络合生成紫红色物质。
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2楼2011-12-22 16:51:27
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chenmin8294

木虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
xiaoxiao270(金币+1): 谢谢 2011-12-22 22:30:13
吸光度值太大了，你可以取样品的时候少取点，标准品也要少点！楼上说得很详细了
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3楼2011-12-22 22:03:47
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pj198811

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我的也很大，3点多。是不是因为杂质太多？扫描后发现最大吸收峰有多个。请问你是用超声提取的吗？具体过程是？
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4楼2012-11-28 23:14:45
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