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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 新手求助——质粒电泳条带问题
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5xiaosh

银虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by longrna at 2011-12-22 09:49:05:
质粒为环状，Marker为线性DNA（跑得慢一些），跑的位置有差异。

嘻嘻，也不能那么慢啊，是不是marker跑出胶了？
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11楼2011-12-22 10:00:39
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5xiaosh

银虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by longrna at 2011-12-22 09:49:05:
质粒为环状，Marker为线性DNA（跑得慢一些），跑的位置有差异。

楼主说质粒没有酶切
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12楼2011-12-22 10:02:20
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longrna

新虫 (正式写手)
就是没有酶切的质粒为环状啊。
一个插入片段为1k的 T载体（3k）加起来总共4k，提到的质粒（4k)电泳肯定不在marker 4k 条带的位置，质粒要跑得快一些。
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伟大航线....
13楼2011-12-22 11:20:25
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neon_alone

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
liuyu_sdili(金币+1): ★有帮助 谢谢帮忙~~ 2011-12-22 16:56:05
质粒大小应该以酶切后的线性来判断大小，因为MARKER中都是线性的，一般质粒提出来都会有3中形式的，所以电泳中一般都会有3条带，很正常
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14楼2011-12-22 14:07:37
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黑盖儿

铁虫 (小有名气)
可能的原因：
1.EB浓度过低
2.胶做的太硬
3.电压太低时间太长，改为120V，25min试试。
4.TAE缓冲液该换了。
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我给不了你宝马香车，锦衣玉食，但我会用一辈子去疼你，爱你，保护你
15楼2013-10-08 14:10:41
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EinsteinIII

铜虫 (小有名气)
你的pUC19最下面那条带知不知道怎么形成的，我的也有那一条，会不会是提质粒的时候的碎片，我的学长说他也见到过。
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Hello,World!
16楼2014-02-17 04:58:44
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