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zuoqian

木虫 (初入文坛)

[求助] 急求关于保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌如何培养(需氧or厌氧)?

我最近利用MRS培养基对这两种菌进行培养计数,可是在37°C下培养了2天,平板上并没有出现白色菌落,不知道是不是因为没有采用厌氧培养方式?我用的就是普通的培养皿倒置培养,求同行解答。。。。

[ Last edited by zuoqian on 2011-12-20 at 11:41 ]
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hollping
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david1as

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

这个关键是要看你要检测的样品中活菌数大概是多少啊!你是取1ml样品然后稀释到10的6次方吗?另外,你涂布平板或者倾注平板时,采用的稀释液的体积是多少?100ul,1ml?如果你取1ml样品稀释并采用1ml倾注平板的话,那么你的样品中活菌数才10的6次方左右,不太高啊!
正常你要保证平板上长出30-300个菌落,这样得出的菌数才比较准确!
一般来说,L.b和S.t在MRS培养基中培养至稳定期后的菌数应该是10的8次方左右,因此,如果你要去1ml样品稀释,且取100ul涂布平板的话,那么你稀释到10的5次方就可以了。
按照你现在的做法,你可以稀释到10的5次方和4次方试一下,看看哪个稀释度能保证平板上的菌落数在30-300之间,你就采用哪个稀释度!
13楼2011-12-21 13:20:06
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wzwhq

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
zuoqian(金币+5): 有帮助 2011-12-20 20:55:12
这两个菌对氧气要求貌似挺严格的,最好放在厌氧箱里,没有的话放在烛缸里也是不错的
2楼2011-12-20 15:37:05
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wjf008

金虫 (正式写手)


【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
amisking(金币+2): 鼓励发帖交流。 2011-12-20 18:25:08
zuoqian(金币+8): ★★★很有帮助 2011-12-20 20:55:46
用厌氧罐培养,或者厌氧箱培养。这两种菌是乳酸杆菌属,是严格厌氧菌,所以在平板表面肯定不会生长。厌氧罐说起来神秘兮兮的,其实就是一个封闭的容器,里面放上去氧剂就可以了。去氧剂可以自己买原料做或者买现成的,都可以。
3楼2011-12-20 16:06:47
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zhymhbu

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
zuoqian(金币+5): 2011-12-20 20:56:03
我认为他们是兼性厌氧菌吧。平板用封口膜封上就行。
微生物学-发酵工程-生化工程-生化与分子生物学-环境毒理学
4楼2011-12-20 19:02:57
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