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【答案】应助回帖
yuanzhang(金币+10, 基金HEPI+1): 谢谢 2011-12-18 17:49:00
WRKY转录因子调控丹参酮生物合成的研究
负责人：申业 参与人：申业, 吴志刚, 姚霞, 王亚君, 张夏楠, 蒋喜红, 张利华
金额：58万 申请时间：2011 学科代码：中药资源(H2801) 项目批准号：81173490
申请单位：中国中医科学院中药研究所 研究类型：基础研究
关键词：丹参;丹参酮生物合成;WRKY转录因子;表达调控
WRKY转录因子是植物最大转录因子家族之一，参与植物生长发育、代谢调控及生物和非生物胁迫的防御。我们前期工作- - 丹参深测序结果，表明WRKY转录因子参与丹参酮生物合成，在生物信息学和基因表达谱分析基础上，RNA干扰转化毛状根，快速筛选出与丹参酮合成相关WRKY基因，且克隆到这两个WRKY基因。本研究在此基础上，采用实时定量PCR、Northern blotting、亚细胞定位等确定其时空表达模式；构建过表达载体和RNA干扰表达载体分别转化丹参或拟南芥，转录水平检测丹参酮合成关键酶基因的表达谱，同时检测脂溶性丹参酮含量的变化，以验证WRKY转录因子调控丹参酮生物合成；凝胶阻滞结合染色质免疫沉淀分析WRKY与DNA的结合活性，酵母双杂交结合免疫共沉淀分析WRKY互作蛋白，以确定WRKY转录因子的调控机制，进而阐明WRKY转录因子在调控丹参酮生物合成中的功能和机制。 |
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