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副干酪乳杆菌的基因敲除试验
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我现在在做副干酪乳杆菌(一种革兰氏阳性细菌)的基因敲除试验,所用工具为无法在其细胞内进行复制的自杀质粒pUC18。采用的是插入失活法,即将一段抗生素抗性基因插入目的片段中间使其失活,再将构建好的重组质粒利用电转化法转入宿主体内,使其与宿主基因组发生同源重组。 我的问题是阳性对照没有问题,但试验组就是没有转化子,一个都不长。请大家帮我看看哪出问题了,谢谢! |
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