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panjie0113

新虫 (小有名气)

[求助] 求助各位大侠高手平板污染问题!!!小女子感激不尽

各位大侠,最近发酵中老是连遇细菌污染,已经连续发酵两批,接的是链霉菌,平板上看不出有细菌污染,但是接发酵液后,一天就发现发酵液成污染的粘稠状,把发酵液接到平板上,一天就长出很多白色菌落。怎么会这样啊???求助!求助!抓狂中………………
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mingzhu392

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
panjie0113(金币+3): 2011-11-26 11:01:10
zhang8826857(金币+2): 鼓励热心虫子 2011-11-27 13:40:49
看看超净工作台和培养箱是不是污染杂菌了。我曾经遭遇到过培养箱污染杂菌。最后解决办法是把培养箱和超净工作台进行熏蒸!
甲醛(福尔马林) 消毒法:
特点:消毒作用较强, 能杀灭细菌、病毒、真菌和芽胞菌,
使用方法:用36 %~40 %的甲醛,按18 ~20 ml/m 3 加热水10 ml ,再加入氧化剂高锰酸钾9 ~10g或漂白粉12 ~16g ,使其气化,密闭熏蒸24h 后,通风换气。
注意事项:消毒时,室温不能低于18 ℃,过低时甲醛不易挥发成气体。。,室温不能低于18 ℃,过低时甲醛不易挥发成气体。
不知道你的会不会是杂菌污染,祝您好运!
2楼2011-11-26 10:17:55
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bintaoD

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
zhang8826857(金币+3): 鼓励新虫 2011-11-27 13:41:00
先看看环境和操作有没有不符合要求。在一切正常的情况下,如果连续污染可考虑菌种方面问题

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源源不断
3楼2011-11-26 10:41:25
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panjie0113

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by mingzhu392 at 2011-11-26 10:17:55:
看看超净工作台和培养箱是不是污染杂菌了。我曾经遭遇到过培养箱污染杂菌。最后解决办法是把培养箱和超净工作台进行熏蒸!
甲醛(福尔马林) 消毒法:
特点:消毒作用较强, 能杀灭细菌、病毒、真菌和芽胞菌, ...

我们是刚搬的实验室,当天做完大扫除,用84消毒液彻底擦过。我是下午大扫除完接的种,接种的平板也没有看到细菌的菌落。。。。如果是操作,连续两次几率也好小。可能会是封口膜的气孔进入的菌吗?我的是个别人的一起放在公共摇床的???
4楼2011-11-26 11:04:12
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panjie0113

新虫 (小有名气)

送鲜花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by bintaoD at 2011-11-26 10:41:25:
先看看环境和操作有没有不符合要求。在一切正常的情况下,如果连续污染可考虑菌种方面问题

操作一直都是这么来的,也没有多大的变动,菌种平板没有看到有别的菌落啊.......
5楼2011-11-26 11:05:35
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suijinkai

木虫 (小有名气)


zhang8826857(金币+1): 鼓励交流 2011-11-27 13:41:30
那会不会是发酵液灭菌不彻底或者是被污染了?是不是用发酵液不接菌培养检测一下?
机会只给有准备的人!
6楼2011-11-27 13:36:06
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ymzhang517

木虫 (正式写手)

★ ★ ★
scelab(金币+3): 谢谢热心回复~ 2011-11-29 18:20:59
如果在接入细菌之前发酵液没问题那就说明发酵液是无菌的。若是接种过程没问题,那就说明培养条件有问题,注意仪器的灭菌,如果还是找不到原因,我觉得很有可能就是你的菌种被感染了。
7楼2011-11-27 15:04:26
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gjs713

至尊木虫 (职业作家)

★ ★ ★
scelab(金币+3): 谢谢热心回复~ 2011-11-29 18:21:12
看看你用的培养基是什么培养基?有些来源的培养基组分本身就带有芽孢之类的污染源,灭菌的时候很难灭彻底,所以会导致这种情况
还有就是你镜检一下你染的是什么菌种,可以有针对性的添加一些抑制剂试试
勤奋、执着、专注,则无坚不破。
8楼2011-11-27 16:17:36
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lishuiqing

铜虫 (初入文坛)

★ ★ ★ ★ ★
scelab(金币+5): 鼓励新虫,谢谢交流哦~ 2011-11-29 18:21:23
你可以排除法试验下 ,发酵罐中只加培养液,不加菌就让它运行,如果出来是有菌的(呢说的白斑杂菌,那就说明发酵罐太脏了,哇卡卡
如果没问题,就是菌种问题,你再用培养瓶接种, 如果有白色杂菌说明是菌种问题,如果没有就说明是你操作的问题。
纯化菌就再想办法了
9楼2011-11-28 10:30:03
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necilyx

金虫 (正式写手)

★ ★ ★ ★ ★
scelab(金币+5): 鼓励新虫,谢谢交流哦~ 2011-11-29 18:21:39
一般来说,发酵过程染菌有多种可能,前期染菌一方面是菌株不纯,或者是发酵罐灭菌不彻底,还有可能是空气滤芯过滤效率下降所致,中后期染菌,有可能是发酵罐接缝处出现渗漏等,从楼主描述的情况来看,首先要排除菌种的问题,建议接种前同时接平板看是否有杂菌,对于发酵罐来说,就需要更灭菌彻底一下,可只加培养基发酵罐灭菌空转(不通无菌空气)一天左右,去发酵液涂平板,再就是做一个通无菌空气的加培养基发酵罐灭菌空转一天左右,去发酵液涂平板,相信一定会找到原因的~~祝好运~~
聪明才智要为意外做准备~~
10楼2011-11-28 10:51:55
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