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nancyyazi

铜虫 (小有名气)

[求助] 离心除菌

各位前辈,我现在要做滤纸片的方法测定酶活性。但是10000rpm离心20min后将上清液滴加至滤纸片上,但问题是滤纸片会长菌。我现在想知道离心除菌靠谱不靠谱?老板说如果菌是纯菌的话离心会全部将菌除去,即上清液是无菌的。如果菌不纯的话是因为划线分离次数不够吗,我都划线6次,还会不纯吗?
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necilyx

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
amisking(金币+2): 鼓励发帖交流。 2011-11-24 18:25:20
nancyyazi(金币+5): 2011-11-25 08:58:52
个人感觉这个离心除菌还真不大靠谱,不管怎么离心,上清液都会有少量以游离状态存在的菌体细胞,即使是很长时间,不能采用滤膜过滤除菌吗~~
聪明才智要为意外做准备~~
2楼2011-11-24 15:43:56
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吴佐浩

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


zhang8826857(金币+1): 鼓励交流 2011-11-25 08:50:36
nancyyazi(金币+5): 2011-11-25 08:59:00
那你先用微滤膜除一次菌呗,应该不会降低酶活吧。
3楼2011-11-24 17:35:21
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gogen

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


zhang8826857(金币+1): 鼓励交流 2011-11-24 22:29:39
nancyyazi(金币+5): 2011-11-25 08:59:12
理论上菌应该完全被离心掉的啊,以前有同学一直是这么做的也没任何问题,和菌是不是纯的没关系吧,同推荐过滤除菌。。。反正一次性的滤器不贵
4楼2011-11-24 18:42:05
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baby88

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
zhang8826857(金币+4): 鼓励新虫 2011-11-24 22:29:47
滤纸片有菌啊,可以将滤纸片在紫外下照个把小时
5楼2011-11-24 20:20:41
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rendy79

至尊木虫 (著名写手)

我也想知道答案,类似的问题。
6楼2011-11-25 08:33:08
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nancyyazi

铜虫 (小有名气)

老板非说我操作有问题……我也觉得离心总有离不下去的
7楼2011-11-25 08:58:00
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yemuren

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


zhang8826857(金币+1): 鼓励应助 2011-11-25 11:46:28
nancyyazi(金币+5): 2011-11-25 18:48:32
如果是细菌或酵母,操作没问题的话,6次划线肯定纯了。不过我还是建议楼主先离心,再过滤,滤纸片可以装在盒子里先灭菌再使用。楼主测什么酶?酶的作用一般不是会很快的吗?
我的专长叫做流浪,所以我就做了流氓~
8楼2011-11-25 10:36:12
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yjingmo

木虫 (著名写手)

修筑

【答案】应助回帖


zhang8826857(金币+1): 鼓励应助 2011-11-25 11:46:44
要知道上清液是否有菌,将上清液镜检就行了,或者将上清液接种培养基 ,看是否有菌生长。如果上清液有菌的话,建议采用过滤除菌
如果我成功了,那么我比别人幸运;如果我失败了,那么我还不够努力!
9楼2011-11-25 11:38:21
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wq123good

金虫 (正式写手)


rainwander(金币+1): 鼓励交流 2011-11-27 08:33:59
建议用过滤除菌,过滤对酶几乎没有影响
过好每一天
10楼2011-11-26 22:57:39
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