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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 土壤磷酸酶测定方法
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小木木木虫

铜虫 (小有名气)

[交流] 土壤磷酸酶测定方法 已有1人参与

取1.00g土壤（<1mm）于50ml 三角瓶中，加入4ml 的醋酸盐缓冲液（pH＝5.8），0.25ml甲苯和0.25ml 用相同缓冲液配置的0.115mol L-1的对－硝基酚磷酸钠溶液，盖上塞子混匀，37℃ 下培养1h，与此同时，作不加基质（用0.25毫升缓冲液代替）的对照。培养结束后，加入0.5 mol L-1的CaCl2 溶液1 ml和4.00ml 0.5mol L-1的NaOH溶液充分混匀后过滤，取2ml滤液用超纯水稀释至10ml，400nm处比色。同时做空白对照，每个样品重复测三次（注意液体量是否够用）

用这个方法做，为什么在做样品的时候会显色，做标准曲线就不显色了呢

郁闷ING。。。
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1楼 2011-11-23 13:43:17
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smile未央

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
您现在还在做么？有没有具体的方法？我从文献里查的对硝基苯酚法里面，用的药剂浓度都不太一样哎~~还有，标曲是怎么做的？
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宁静致远
3楼2013-07-18 12:40:39
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小木木木虫

铜虫 (小有名气)
★ ★
看天(金币+2): 鼓励 分享一下啊 2011-11-23 17:55:00
引用回帖:
1楼: Originally posted by 小木木木虫 at 2011-11-23 13:43:17:
取1.00g土壤（<1mm）于50ml 三角瓶中，加入4ml 的醋酸盐缓冲液（pH＝5.8），0.25ml甲苯和0.25ml 用相同缓冲液配置的0.115mol L-1的对－硝基酚磷酸钠溶液，盖上塞子混匀，37℃ 下培养1h，与此同时，作不加基质（ ...

有同样问题的同学可以联系我，我想到原因了
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2011-11-23 16:51:22
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