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quanquan1975

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
10楼: Originally posted by cz2004cz at 2011-11-21 10:58:20:
这个要看你是什么性质的支架了啊?
我以前也是掉片,片子很不完整了,
不过后来改为冰冻切片就好多了,
特别是冰冻温度要低,至少要把你的材料冻住!

请教下~并且的话你是固定后蔗糖脱水然后切片吗?那载玻片是用进口的还是直接拿多聚赖氨酸之类的粘着剂自己处理呢?因为我是脱水后切片,用的是自己处理的载玻片,可是染色过程中掉片非常厉害。
11楼2011-11-23 14:47:41
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cz2004cz

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
11楼: Originally posted by quanquan1975 at 2011-11-23 14:47:41:
请教下~并且的话你是固定后蔗糖脱水然后切片吗?那载玻片是用进口的还是直接拿多聚赖氨酸之类的粘着剂自己处理呢?因为我是脱水后切片,用的是自己处理的载玻片,可是染色过程中掉片非常厉害。

冰冻切片不需要脱水,
直接新鲜组织上冷冻切片机切就可以了;
切完以后,按冰冻切片的方式做常规染色和免疫组化即可!
当然必须用免疫组化的片子,外加长时间烤片!
修和无人见,存心有天知!
12楼2011-11-23 17:08:30
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quanquan1975

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
12楼: Originally posted by cz2004cz at 2011-11-23 17:08:30:
冰冻切片不需要脱水,
直接新鲜组织上冷冻切片机切就可以了;
切完以后,按冰冻切片的方式做常规染色和免疫组化即可!
当然必须用免疫组化的片子,外加长时间烤片!

你之前说的冰冻温度低,是要多少度?-22℃够吗?
免疫组化的片子你们是自己处理的还是买的呢?如果是买的方便透露下是哪个公司哪个型号的吗?长时间的烤片是多久呢?我用37℃烤了30-60min,结果还是掉片的厉害,进行HE染色到盐酸酒精分色那部组织就已经掉光了。
13楼2011-11-25 10:29:58
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q317476148

铁杆木虫 (著名写手)

喵星人

【答案】应助回帖


markar: 金币+1, 感谢回帖交流,欢迎常来生物材料版! 2012-06-22 15:05:11
为什么我的小鼠肾脏切片在切片、捞片时都挺好 挺完整,但是当片子上的水干掉时,切片就开始产生裂缝,很多很小的缝。同时做的其它组织切片很正常,求高手指点。
14楼2012-06-22 10:55:48
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