应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 蓝白斑筛选卫星菌落问题
242/3返回列表上一页123下一页
查看: 3805  |  回复: 23
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

精精

金虫 (小有名气)
引用回帖:
1楼: Originally posted by 精精 at 2011-11-15 11:21:55:
蓝白斑筛选培养19小时，菌落仍旧很小，但是出现很多卫星菌落，以前不会那么早出现卫星菌落的，严重影响我挑取单菌落，请教各位大侠，是什么原因会那么早出现卫星菌落啊？谢谢
[eimg]f5/89/1136439_1321327 ...

还有就是挑白斑后，转化子用M13引物扩增，会扩出两三百的来（目的基因1000多），这对引物也不太好啊
赞一下 回复此楼
少才微善
11楼2011-11-17 09:46:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

精精

金虫 (小有名气)
引用回帖:
11楼: Originally posted by 精精 at 2011-11-17 09:46:33:
还有就是挑白斑后，转化子用M13引物扩增，会扩出两三百的来（目的基因1000多），这对引物也不太好啊

这是扩的空的载体上的序列吧？
赞一下 回复此楼
少才微善
12楼2011-11-17 09:48:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西瓜

荣誉版主 (知名作家)
引用回帖:
10楼: Originally posted by 精精 at 2011-11-17 09:43:48:
16个小时左右就不怎么长，一到将近20个小时的时候就很多，但是有时候转化子就长的慢。

可能跟感受态也有关。我们实验室以前的感受态细胞，转化后16小时左右菌落就长得很大了，但最近这一批感受态，普遍要20个小时才能长出很小的菌落……
赞一下 回复此楼
13楼2011-11-17 18:36:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

821678162

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
西瓜(金币+1): 欢迎新虫交流哦 2011-11-17 21:41:12
进行蓝白斑筛选的菌培养时间不要超过16h，一般12-16左右合适，如果是构建质粒的话用不着蓝白斑，假阳性和假阴性比较多，我们这里就直接扎菌PCR，看结果。
赞一下(1人) 回复此楼
14楼2011-11-17 19:10:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

精精

金虫 (小有名气)
引用回帖:
13楼: Originally posted by 西瓜 at 2011-11-17 18:36:19:
可能跟感受态也有关。我们实验室以前的感受态细胞，转化后16小时左右菌落就长得很大了，但最近这一批感受态，普遍要20个小时才能长出很小的菌落……

这个是的，我上次那个感受态长得比这个更慢。。。
赞一下 回复此楼
少才微善
15楼2011-11-18 09:18:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

精精

金虫 (小有名气)
引用回帖:
14楼: Originally posted by 821678162 at 2011-11-17 19:10:35:
进行蓝白斑筛选的菌培养时间不要超过16h，一般12-16左右合适，如果是构建质粒的话用不着蓝白斑，假阳性和假阴性比较多，我们这里就直接扎菌PCR，看结果。

嗯，谢谢！
回复此楼
少才微善
16楼2011-11-18 09:19:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen

【答案】应助回帖

1：培养时间过长，一般情况下12-16小时左右就可以长出单克隆，随即挑取单克隆即可；
2：不过长出了微卫星菌落，你挑目的菌落的时候带上了微卫星其实也是无所谓的，微卫星菌落在带抗生素的板子上是不长的。。。
祝好运！
赞一下 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

精精
Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
17楼2011-11-18 10:23:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

飘在海上的雪

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

有的人 说是连接的时候出现的问题。
赞一下 回复此楼
不在沉默中爆发，就在沉默着死亡！
18楼2011-11-19 11:34:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

healerly

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
19楼2011-11-19 11:40:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

精精

金虫 (小有名气)
引用回帖:
12楼: Originally posted by 精精 at 2011-11-17 09:48:33:
这是扩的空的载体上的序列吧？

是的，这个200多的应该是没连接上
赞一下 回复此楼
少才微善
20楼2011-11-19 15:52:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 精精 的主题更新
242/3返回列表上一页123下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 9/450 2026-11-06 02:26 by qL1cU46YIdK0
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 10/500 2026-11-06 02:24 by qL1cU46YIdK0
[基金申请] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 10/500 2026-11-06 02:24 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 8/400 2026-11-06 02:24 by qL1cU46YIdK0
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 9/450 2026-11-06 02:15 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 11/550 2026-11-06 02:13 by qL1cU46YIdK0
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 7/350 2026-11-06 02:13 by qL1cU46YIdK0
[考博] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 7/350 2026-11-06 02:13 by qL1cU46YIdK0
[考研] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 13/650 2026-11-06 02:02 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 9/450 2026-11-06 02:02 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 hNpp4Y2CGvSC 2026-11-04 12/600 2026-11-06 01:53 by qL1cU46YIdK0
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +6 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 10/500 2026-11-06 01:51 by qL1cU46YIdK0
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +6 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 12/600 2026-11-06 01:40 by qL1cU46YIdK0
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +6 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 10/500 2026-11-06 01:31 by qL1cU46YIdK0
[公派出国] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +7 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 21/1050 2026-11-06 01:29 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +5 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 11/550 2026-11-06 01:20 by qL1cU46YIdK0
[考博] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-05 4/200 2026-11-05 23:39 by qL1cU46YIdK0
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +5 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 13/650 2026-11-05 22:44 by qL1cU46YIdK0
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 12/600 2026-11-05 11:10 by PYZmcHr5kSaq
[基金申请] 各位基础老师们，看完中央《从严治党》的决定后，对学术界更加有信心了吧 +5 iaeyuan 2026-11-01 5/250 2026-11-04 14:43 by jinchengzi
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭