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小木木木虫铜虫 (小有名气)
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[求助]
关于蛋白酶底物的选择~~~~~
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看到前辈们有的用铜盐法，有的用福林试剂法 我用的是福林试剂法，但在测定过程中滴加碳酸钠后部分水样会出现浑浊，使劲摇晃后浑浊减轻，产生大量气泡，但不透彻，无法进行比色。 详细方法如下，请前辈们指教： 取1.00克土壤（< 2 mm）于大试管内。加入1ml pH为8.0的Tris-HCl缓冲液。用0.5ml甲苯盖盖处理15min。再加入2ml 1％的酪素溶液，将混合物仔细摇匀，橡胶塞封口，置于37 ℃恒温箱放置24h。与此同时，作不加基质（用2毫升缓冲液代替）的对照。培养结束后，加入3ml三氯醋酸溶液，摇匀，待沉淀完全过滤，除去沉淀。吸取1ml滤液于试管内，加入5ml 0.4M的Na2CO3溶液，1ml Folin- Ciocalteu试剂，定容到25ml，充分摇匀后于37℃恒温箱中培养15min，显色充分后在680nm下比色。 |
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