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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 今天提取的丹参DNA
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wskxbxf

新虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by 威廉退耳 at 2011-11-11 13:03:08:
是不是你的材料里糖类的杂质比较多呢

是 糖类含量相对比较多 我今天稍微增加了点儿CTAB的量 不知道还有别的什么办法可以改善一下
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11楼2011-11-11 18:26:33
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威廉退耳

金虫 (著名写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
wanhscn(金币+1): 鼓励交流! 2011-11-11 21:33:50
引用回帖:
11楼: Originally posted by wskxbxf at 2011-11-11 18:26:33:
是 糖类含量相对比较多 我今天稍微增加了点儿CTAB的量 不知道还有别的什么办法可以改善一下

可以先配制一些去糖buffer，在磨好样品粉末以后用去糖buffer处理，然后再用CTAB提取。如果在抽取上清液的时候发现交界处有粘稠物很容易被吸上来，一定要小心不要吸到。
不知道你提取DNA是做什么用，有些实验这样的DNA还是可以用的，干扰不大。
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12楼2011-11-11 21:08:51
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wanhscn

木虫 (职业作家)

哲学@草根
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
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12楼: Originally posted by 威廉退耳 at 2011-11-11 21:08:51:
可以先配制一些去糖buffer，在磨好样品粉末以后用去糖buffer处理，然后再用CTAB提取。如果在抽取上清液的时候发现交界处有粘稠物很容易被吸上来，一定要小心不要吸到。
不知道你提取DNA是做什么用，有些实验这样 ...

好主意!
就是先去糖buffer处理会不会使DNA没有抽出来时就被细胞自身的DNA酶降解?
去糖BUFFER自己配的?还是买的?
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真相是最大的奢侈品
13楼2011-11-11 21:33:24
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威廉退耳

金虫 (著名写手)
★ ★
wanhscn(金币+2): good!对楼主有帮助! 2011-11-11 21:45:15
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13楼: Originally posted by wanhscn at 2011-11-11 21:33:24:
好主意!
就是先去糖buffer处理会不会使DNA没有抽出来时就被细胞自身的DNA酶降解?
去糖BUFFER自己配的?还是买的?

应该不会，我以前是在一个平台实验室做实验用过，去糖buffer是实验室老师配的，具体配方不太清楚，你可以搜一搜或者去别的实验室问问
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14楼2011-11-11 21:42:18
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wskxbxf

新虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by 威廉退耳 at 2011-11-11 13:03:08:
是不是你的材料里糖类的杂质比较多呢

是的 比较多
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15楼2011-11-12 19:25:24
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wskxbxf

新虫 (小有名气)
引用回帖:
14楼: Originally posted by 威廉退耳 at 2011-11-11 21:42:18:
应该不会，我以前是在一个平台实验室做实验用过，去糖buffer是实验室老师配的，具体配方不太清楚，你可以搜一搜或者去别的实验室问问

非常感谢 我试试
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16楼2011-11-12 19:26:59
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wskxbxf

新虫 (小有名气)
引用回帖:
12楼: Originally posted by 威廉退耳 at 2011-11-11 21:08:51:
可以先配制一些去糖buffer，在磨好样品粉末以后用去糖buffer处理，然后再用CTAB提取。如果在抽取上清液的时候发现交界处有粘稠物很容易被吸上来，一定要小心不要吸到。
不知道你提取DNA是做什么用，有些实验这样 ...

哦 是 老师说可能这个OD260/230这个值对后期影响不大 我后期想做AFLP 不知道是不是真的影响不大 呵呵 请假一下
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17楼2011-11-12 19:28:29
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威廉退耳

金虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
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17楼: Originally posted by wskxbxf at 2011-11-12 19:28:29:
哦 是 老师说可能这个OD260/230这个值对后期影响不大 我后期想做AFLP 不知道是不是真的影响不大 呵呵 请假一下

我之前做的是ssr，如果用这种DNA扩增，几乎没什么影响
据试验平台一起做实验的同学说，AFLP对DNA的要求高一些，如果第一步提取处理不好，DNA质量不是很高，后期的读带会很受影响，毕竟AFLP的带很多，如果有杂带可能不容易排除。处理数据会比较头大
我不确定你这种情况是否有影响，只能说AFLP的DNA最好是质量要高一些
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18楼2011-11-12 19:42:51
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wskxbxf

新虫 (小有名气)
引用回帖:
18楼: Originally posted by 威廉退耳 at 2011-11-12 19:42:51:
我之前做的是ssr，如果用这种DNA扩增，几乎没什么影响
据试验平台一起做实验的同学说，AFLP对DNA的要求高一些，如果第一步提取处理不好，DNA质量不是很高，后期的读带会很受影响，毕竟AFLP的带很多，如果有杂带 ...

哦 非常感谢 我这几天也在摸索高质量的我的这个材料的DNA提取方法 以免对后期有影响 谢谢了 呵呵
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19楼2011-11-12 21:33:46
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wskxbxf

新虫 (小有名气)
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18楼: Originally posted by 威廉退耳 at 2011-11-12 19:42:51:
我之前做的是ssr，如果用这种DNA扩增，几乎没什么影响
据试验平台一起做实验的同学说，AFLP对DNA的要求高一些，如果第一步提取处理不好，DNA质量不是很高，后期的读带会很受影响，毕竟AFLP的带很多，如果有杂带 ...

对了  有个问题还想请教一下 你的同学说AFLP要求高质量的DNA  能不能简单描述一下具体的要求呢 我看有的人指导意见是OD260/280的值要求在1.8左右，对OD260/230的值要求不是那么大 不知道是不是这样 求指导
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20楼2011-11-12 21:39:32
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