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xiaoyeting12

铜虫 (小有名气)

[求助] 绘制尿激酶标准曲线的纤维蛋白平板制作方法 已有1人参与

哪个大侠知道绘制尿激酶标准曲线的纤维蛋白平板制作方法,在此多谢啦!
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释天1

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

(1)试剂0.01mol/L磷酸盐缓冲液(pH7.8) 取磷酸氢二钠3.58g,加水
使溶解并稀释至1000mL为A液;取磷酸二氢钠(NaH PO ·2H 0)0.78g,加水使溶解并稀释至500mL为B
液;将A、B两液混合至pH值为7.8。
工作溶液取0.01 mol/L磷酸盐缓冲液(pH7.8)与0.9%氯化钠溶液(1:17)混合。
1.5%琼脂糖溶液取琼脂糖1.5g,加工作溶液100mL加热溶解。
纤维蛋白原溶液取纤维蛋白原适量,加工作溶液制成每lmL中含1.5mg的可凝蛋白溶液。
凝血酶溶液取凝血酶,加0.9%氯化钠溶液制成每1mL中含1 BP单位的溶液。
(2)标准品溶液的制备 取蚓激酶标准品,用0.9%氯化钠溶液制成浓度分别为每lmL中含10000,
8000,6000,4000,2000蚓激酶单位的溶液。
(3)供试品溶液的制备取本品适量,加0.9%氯化钠溶液使溶解并稀释成标准曲线范围内的浓度。
(4)测定法取纤维蛋白原溶液39mL,置烧杯中,边搅拌边加入55℃琼脂糖溶液39mL、凝血酶溶液
3.0mL,立即混匀,快速倒入直径14cm塑料培养皿中,室温水平放置1小时,打孔。精密量取不同浓度的蚓
激酶标准品溶液及供试品溶液各10 ,分别点在同一平皿中,加盖,置37℃恒温箱中反应18小时。取出后
用卡尺测量溶圈垂直两直径,以蚓激酶标准品单位数的对数为横坐标,垂直两直径乘积的对数为纵坐标,计
算回归方程,将供试品垂直两直径乘积的对数代人回归方程,计算供试品效价单位数。标准品与供试品应各
做两点,以平均值计算
2楼2014-04-10 08:30:21
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