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Tporker

金虫 (小有名气)

[求助] 求助离子交换柱的选择?

离子交换柱层析选择柱子的参数是根据什么来的?我的蛋白质是pI=6.27,分子量是20左右,这样的话选择什么样的柱子比较好?
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网点点75

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
西瓜(金币+2): 鼓励交流 2011-11-07 18:52:19
DEAE-纤维素常用来分离中性或酸性蛋白质,洗脱条件温和,关键看你从什么样品中分离目的蛋白,杂蛋白的性质如何
2楼2011-11-07 16:31:24
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jianqiangsui

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
西瓜(金币+2): Good 2011-11-22 18:03:16
离子交换柱层析,选择柱子一般是根据缓冲液的pH,如果缓冲液的pH大于蛋白质的PI,蛋白质带负电荷,可以选用阴离子交换柱;反之选阳离子交换柱
学海无涯
3楼2011-11-08 22:24:43
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snoopyzxx

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
西瓜(金币+2): 补上奖励 2011-11-22 18:03:36
你这个最好先试阴离子交换,用pH8.0-9.0的缓冲都可以,具体哪个ph好,要试。
也可以用阳离子交换,pH低于等电点。
一般相差1-2个pH就可以挂柱了。效果如何,没人知道的,要自己试。或者查文献,看别人怎么做的,免得走弯路。
VX:19192310212;公众号:生物技术与IVD
4楼2011-11-09 08:33:24
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Tporker

金虫 (小有名气)

我看有些还说这是弱酸型的,是不是用盐型的比较好?阳离子柱用盐处理一下,转成盐型的,是不是这样分离的效果更好一点??
有个是用阳离子的,SP XL,是不是磺酸基的?这是不是强酸型的?
值,夜渐浓,闻窗外蛙鸣,辗转无眠难入梦;此,风渐清,听庭内雨应,悱恻浮醒忆青笼。
5楼2011-11-09 10:09:41
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lihuan0525

金虫 (职业作家)

2楼和3楼说的挺全了
6楼2011-11-09 10:42:04
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linsy8511

铁虫 (小有名气)

DEAE,缓冲液pH 8-9
7楼2011-11-22 17:16:16
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青豆同学

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


西瓜(金币+1): 鼓励交流 2011-11-23 17:41:20
阴离子交换树脂Q-Sepharose 范围较宽 但是吸附量我忘记了
谢谢你给我信心与力量,我会努力!
8楼2011-11-22 21:55:36
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Tporker

金虫 (小有名气)

引用回帖:
: Originally posted by 青豆同学 at 2011-11-22 21:55:36:
阴离子交换树脂Q-Sepharose 范围较宽 但是吸附量我忘记了

我都借到了,弱阴弱阳的柱子,打算都试一下。。
值,夜渐浓,闻窗外蛙鸣,辗转无眠难入梦;此,风渐清,听庭内雨应,悱恻浮醒忆青笼。
9楼2011-12-19 11:02:10
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