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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 噬菌体DNA提取
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lcf004

木虫 (著名写手)
那当然，哈哈
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11楼2011-11-06 22:45:05
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saint_zelin
12楼2011-12-28 14:08:59
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jiajingjing

铁虫 (正式写手)
lcf004: 回帖置顶 2011-12-30 08:20:29
首先，将纯化好的噬菌体悬液0.5 mL加入50µL 10% SDS 和 5µL 0.5 mol/L EDTA在68℃的条件下处理15 min，凉至室温，加入5µL10mg/mL蛋白酶K，在37℃的条件下处理1h。
再次，上诉液体加入等体积的苯酚-氯仿-异戊醇(25:24:1)，离心去蛋白，取上清，加入等体积的氯仿-异戊醇(24:1)，离心取上清，加入等体积的异丙醇，在-20℃沉淀噬菌体DNA，至少1h。
最后，噬菌体的DNA液体离心，用乙醇洗2次，溶解在TE缓冲液(10mM Tris-HCl,pH8.0;1M EDTA)中。
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13楼2011-12-29 10:43:09
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