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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 真菌细胞壁破裂酶
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sun1123moon

铜虫 (小有名气)

[求助] 真菌细胞壁破裂酶

真菌细胞壁破裂酶用什么？在哪一步使用？
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1楼 2011-11-03 18:54:51
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古韵新声

金虫 (小有名气)
我也想知道怎么样使真菌细胞破壁效果好？现在在提取酵母蛋白，总是破壁效果不好，提取效率低。
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3楼2011-11-04 08:49:40
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baby1_9253344

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
zhang8826857(金币+1): 鼓励 2011-11-04 08:36:32
真菌细胞壁破裂酶用蜗牛酶，第一步使用
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2楼2011-11-04 08:20:49
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sun1123moon

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by baby1_9253344 at 2011-11-04 08:20:49:
真菌细胞壁破裂酶用蜗牛酶，第一步使用

那具体操作方法是怎样的？是不是我取了菌丝后直接加蜗牛酶，然后再去提DNA??
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4楼2011-11-04 09:58:53
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baby1_9253344

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
rainwander(金币+2): 鼓励交流 2011-11-04 16:16:23
引用回帖:
4楼: Originally posted by sun1123moon at 2011-11-04 09:58:53:
那具体操作方法是怎样的？是不是我取了菌丝后直接加蜗牛酶，然后再去提DNA??

我用的酵母质粒提取试剂盒里面说的，每20mg湿重菌体加600微升酶解缓冲液，1.2微升巯基乙醇和50微升蜗牛酶，37度温育3小时之后加溶液1，溶液2...
酶解缓冲液：1mM山梨醇，10mMCaCl2,0.1MEDTA，pH7.5
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5楼2011-11-04 14:41:54
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