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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 高效液相色谱如何确定波长
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tim2010hf

木虫 (正式写手)

[求助] 高效液相色谱如何确定波长

实验室仪器默认的是在254nm单波长，以前做的还挺好的，这2天我在这一波长下进样，根本看不见出峰，或是峰高太低，几乎看不出来。然后我保存后打开对应的文件，换了个220nm的波长，就能看见峰了，而且峰高也有800。

每当我换个波长，对应的色谱图都会变化，每个物质对应的含量也会发生变化，我应该在什么波长下观察我的色谱图呢？假如有3个物质，怎么确定每个物质的最大吸收波长？每个物质最大吸收波长都不一样，我又该在那个波长下观察呢？纠结啊纠结....
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1楼 2011-11-03 16:54:27
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信彬

铜虫 (初入文坛)
在带DAD检测器的仪器上，打开光谱菜单，分别单击每个你所需监测的峰，就会看到每个峰的波长吸收曲线，按住ctrl键再单击峰就会将不同峰的光谱图叠加在一起，通过叠加的光谱图，选择各峰吸收都比较大的波长作为检测波长。如果样品有做过核磁，还可将不同波长下的主峰纯度与核磁结果进行比较，选择与核磁结果接近的波长作检测波长。波长定下来以后就一直用该波长监测反应，就能说明反应的进展。如果是做含量，通过外标或内标，样品与标准品选择的是同一波长，不用考虑不同波长会带来影响。
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20楼2011-11-07 00:27:44
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njkinghu

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

tim2010hf(金币+30): 所选波长不同，每个成分的百分含量就不同，我怎么确定所要成分的含量呢？ 2011-11-04 09:48:28
扫描一个紫外图谱，有紫外分光光度计扫描，从大波长到低波长，最大吸收峰都会标注出来，如果你要进多各样，可以选择一个各个峰吸收值都较大的波长做
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2楼2011-11-03 17:09:03
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lifuyun666

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

你自己看着办把  最好换一下吸收液
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3楼2011-11-03 17:18:33
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jangely

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by lifuyun666 at 2011-11-03 17:18:33:
你自己看着办把  最好换一下吸收液

做紫外光谱扫描。找出最大吸收的波段。即可确定！
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4楼2011-11-03 17:42:02
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