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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 如何使蛋白质单分散？
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meixiner

禁虫 (小有名气)
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1楼2011-11-03 15:50:29
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meixiner

禁虫 (小有名气)
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3楼2011-11-03 22:37:17
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献
你是指monodisperse么？
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The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
2楼2011-11-03 20:42:29
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

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【答案】应助回帖

meixiner(金币+2): 2011-11-03 22:59:25
adslye(BioEPI+1): 很好，很有用~ 2011-11-04 16:19:04
这个跟你表达纯化的蛋白质的构象有关，有些蛋白质纯化出来就是很单一的一种状态。但是有一部分不是，纯化出来可能会是单体、二聚体甚至多聚等状态的混合物。有的时候加一些还原剂比如巯基乙醇，DTT等可以使得蛋白的状态转向更为均一。但很大程度上还是要看蛋白本身的特性。

我们检测蛋白均一性的时候经常同时使用以下几种方法：1，分子筛看峰图，是不是单一峰；2 Native-PAGE，看条带是不是单一；3 Dynamic light scatting（DLS）也就是动态光散射，这个可以直接测定蛋白的均一性，尤其是对于球蛋白。
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The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
4楼2011-11-03 22:57:30
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affable

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

meixiner(金币+2): 2011-11-04 10:04:20
楼上所述很正确，要单分散先看蛋白分离纯化出来是什么状态，有时可以用不同缓冲液，或者不同pH值调节达到目的，如果是二硫键连接还得添加还原剂，根据导致蛋白聚合原因来考虑，不同情况分别讨论。
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5楼2011-11-04 09:41:28
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