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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » DNA片段经过酶切后的粘性末端怎么磨平？
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浪花上的波涛

银虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by yxwjimmy at 2011-10-28 17:03:32:
要区分5'突出还是3'突出
T4 DNA polymerase 能补平或切除

感谢您的回复，
酶切的结果是3‘突出。。。
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What did I do / what would I do...
11楼2011-10-28 17:49:17
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yxwjimmy

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
adslye(金币+2): 鼓励交流~~ 2011-10-30 10:55:48
3‘突出就不能用高保真酶做PCR的方式补平了，用T4 DNA polymerase 吧
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12楼2011-10-29 16:40:14
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浪花上的波涛

银虫 (小有名气)
浪花上的波涛: 回帖置顶 问题及回答相关性更佳 2011-10-29 20:45:45
引用回帖:
12楼: Originally posted by yxwjimmy at 2011-10-29 16:40:14:
3‘突出就不能用高保真酶做PCR的方式补平了，用T4 DNA polymerase 吧

我的目的主要是想：要么把这个粘性的末端去掉；或者是补平后能够保证，再用同样的酶无法识别切割这个位点。。。还需要做些什么处理呢？
谢谢了。。。
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What did I do / what would I do...
13楼2011-10-29 20:44:12
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浪花上的波涛

银虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by gongeleven at 2011-10-28 00:15:35:
这个容易
takara有DNA Blunting Kit

请问按照您的做法，能够保证再用同样的酶切割无法识别此位点吗？ 或者说还需要做些什么才能达到我期望的目的？？？谢谢大家的热心回答。。。
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What did I do / what would I do...
14楼2011-10-29 20:48:22
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瓶儿花

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
adslye(金币+2): 鼓励交流~祝顺利！ 2011-10-30 10:56:27
浪花上的波涛(金币+2): 感谢您的回答，恕小弟金币有限，聊表心意~ 2011-11-02 16:27:28
如果是补平的话用takara 的Kenow I补平就好了，如果是切平末端的话用takara的T4 DNA 聚合酶作用就好了。补平或切平以后酶切位点就不能被识别了，用原来的酶是切不动的。
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15楼2011-10-30 00:04:03
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浪花上的波涛

银虫 (小有名气)
感谢大家的热心回答，大家的回答对我帮助很大~ 恕 我金币有限，就分配给没有得到奖励的朋友吧。。。望大家理解
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What did I do / what would I do...
16楼2011-11-02 16:22:13
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