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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 关于滤膜孔径大小的求助，筛土壤，让细胞滤过
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songrentai

铜虫 (小有名气)

[求助] 关于滤膜孔径大小的求助，筛土壤，让细胞滤过

本人正在做土壤中某基因阳性菌株的筛选，先将土壤研细，之后过200目筛子，无菌水悬起，100g，离心，5min，取上清，此时想要将大部分土壤滤掉，请问应该用多大孔径的滤膜？已经试过孔径40 μm的滤膜，没有作用。
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就这样吧
1楼 2011-10-18 13:38:18
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songrentai

铜虫 (小有名气)
注：之后想要采用小量密度梯度离心法，尽量增大细胞浓度，减少土壤含量
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就这样吧
2楼2011-10-18 13:39:13
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

从大孔到小孔多次过滤，逐渐除去杂质。最后用40μm的膜，孔径已经足够大了。不过细菌容易吸附在泥土上
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3楼2011-10-20 13:00:45
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

为什么一定要过滤？带泥土培养又能如何？反正你过滤出来的也是大杂烩。
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4楼2011-10-20 13:03:47
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songrentai

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by jurkat.1640 at 2011-10-20 13:03:47:
为什么一定要过滤？带泥土培养又能如何？反正你过滤出来的也是大杂烩。

现在需要将细胞弄出来，提DNA，进行PCR，看看是否有我需要的阳性基因，以便确定之后是否要继续操作该土样
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就这样吧
5楼2011-10-27 15:08:48
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fuxhong

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

直接用土壤DNA提取试剂盒可以吗？
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6楼2011-11-14 14:33:05
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