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ayuan7165

木虫 (正式写手)

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[求助] 扫描探针显微镜与扫描电子显微镜

实验室拥有的扫描电子显微镜不是特别好，最大放大倍数只有30000倍；我希望看到的藻细胞表面的形貌还不是特别清楚。另外实验室还有个扫描探针显微镜，放大倍数将远远超过SEM，不知道这个可以用来看藻细胞表面形貌吗？藻细胞需要做什么前处理？冷冻干燥吗？
还望高手相助！！！

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songweiling

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1楼 2011-10-17 21:59:34

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michaelcyq

铁杆木虫 (小有名气)

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
zhang8826857(金币+4): good，看lz的反馈，确实帮到lz的话可以向版主申请EPI啊，呵呵，加油 2011-10-18 08:33:39
ayuan7165(金币+15): 多谢多谢！！打了这么多字O(∩_∩)O~我也都试试干燥和不干燥的吧，再次多谢高手！ 2011-10-18 08:36:31

SPM理论上可以看到原子，但是一般SPM的可能比较困难，我们实验室的AFM分辨率能到0.1nm，但是一般的实验用不到这么极端的条件，呵呵。不过看细菌的鞭毛菌毛等超微结构就足够用了，相信看藻类更是绰绰有余。测定时一般不需要任何前处理，甚至在液体中可以直接测量。同时和EM比，AFM出来的图像是真3D的。
我在液体中测过细菌形态，不过需要细胞自己黏附或者预先固定在较平的介质上。我也测过干燥过后的细胞，但是细胞失水和液体中测得形貌差异较大。
AFM还需要注意选择合适的探针及扫描模式。对于细胞这种很软的实验对象，推荐使用tapping mode。这种模式下探针对于细胞表面作用力相对较小，且无侧向力刮擦样品，出来图像较为清晰，且有phase image可以供分析。但是tapping mode测定时间较长，不太利于观察细胞分裂等短时间变化。也有一些研究用contact mode来观测细胞，优点就是速度快。缺点很多：需要用spring constant非常小的探针(也就是很软)，容易刮擦样品，且无法获得phase image等。