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电泳

木虫 (著名写手)

[求助] 诡异的液相柱压升高问题

日立2000液相,单跑流动相,柱压会一直升高,平均每小时升高0.3MPa,如果进样,升高速度会加快,平均进一阵会升高0.5MPa,每针8分钟。把进样器换了,也没有改善。换色谱柱,柱压正常。换了液相系统(Waters)跑同一个流动相,同样的色谱柱,进同样的样,柱压不会升高。。。。

到底问题出在哪?

[ 来自科研家族 生物医药家族 ]

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心中有路,何惧海角天涯。
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lijunqing525

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

很可能是柱子堵了,你把色谱柱倒过来用试试!
宠辱不惊,看庭前花开花落;去留无意,看天外云卷云舒。
2楼2011-09-25 14:49:41
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破土草儿

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
1楼: Originally posted by 电泳 at 2011-09-25 11:53:23:
日立2000液相,单跑流动相,柱压会一直升高,平均每小时升高0.3MPa,如果进样,升高速度会加快,平均进一阵会升高0.5MPa,每针8分钟。把进样器换了,也没有改善。换色谱柱,柱压正常。换了液相系统(Waters)跑同 ...

这个很可能是你溶剂系统中的水相太久没用了,长东西了,堵柱子了所以压力高。还有可能是水相缓冲盐相对加的太多了,因为你跑柱子的时候,很可能有机相太高了,水相太低了,那么缓冲盐在有机相慢慢析出,堵塞柱子,持续升高柱压力。
3楼2011-09-26 22:49:44
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walkinghand

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

这个影响因素该不是一般的多啊,我想要是你方法没问题,可能主要因为你处理样或处理机子出问题了,还有你测得样,杂质多很容易这样的,比如血清样品
4楼2011-09-28 10:27:17
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电泳

木虫 (著名写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 破土草儿 at 2011-09-26 22:49:44:
这个很可能是你溶剂系统中的水相太久没用了,长东西了,堵柱子了所以压力高。还有可能是水相缓冲盐相对加的太多了,因为你跑柱子的时候,很可能有机相太高了,水相太低了,那么缓冲盐在有机相慢慢析出,堵塞柱子 ...

水相新配,管路也冲洗了,水相中就一点三乙胺,没别的盐。水油比例7:3.
心中有路,何惧海角天涯。
5楼2011-09-28 10:36:36
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电泳

木虫 (著名写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by walkinghand at 2011-09-28 10:27:17:
这个影响因素该不是一般的多啊,我想要是你方法没问题,可能主要因为你处理样或处理机子出问题了,还有你测得样,杂质多很容易这样的,比如血清样品

体外样品,标准品。
心中有路,何惧海角天涯。
6楼2011-09-28 10:37:31
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