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叶风and花影

银虫 (小有名气)


[交流] 胶体金 抗原

制备胶体金试纸条,所用的抗原必须要是当初免疫小鼠时用的抗原么,如果不一样会有多大差别啊。比如免疫抗原连接的是BSA,制备胶体金用连接OVA的可以么,连接OVA的是我用来做ELISA的。
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引用回帖:
4548162楼: Originally posted by 叶风and花影 at 2012-04-29 15:29:45:
ELISA检测时ok的,就是溶解性很差,做胶体金试纸条时就很麻烦啊,总觉得连上那个大极性BSA后怎么溶解性还这么差呢,可是免疫小鼠都是没问题的,求指教啊,thx

你可以减低溶液的极性试试看能不能增加抗原溶解性,可以往溶液中加入蔗糖或甘油,不要超过1.5mol/L。
溶解性主要是由分子表面的极性基团决定的,你的半抗原分子链接上BSA,必然在其分子表面,原来的疏水的半抗原是在BSA已经折叠完毕之后连接上其分子表面的,一般不会引起BSA折叠状态的改变,所以疏水的半抗原分子还是裸露在极性的水环境中,因此溶解性不高。
9楼2012-04-29 18:19:40
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1254085935

木虫 (小有名气)



叶风and花影(金币+1): 谢谢参与
我在做,却得不出结果
3楼2012-04-12 20:48:19
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fondbelief

新虫 (小有名气)



叶风and花影(金币+1): 谢谢参与
免疫抗原连接BSA,也可以做ELISA,为什么非得换成偶联OVA呢?
4楼2012-04-25 16:59:22
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叶风and花影(金币+1): 谢谢参与
因为你没有说具体情况,不过我可以提醒你:同样的半抗原与不同的连接蛋白质形成的完全抗原的免疫反应性不是有半抗原唯一决定的,这方面有不少SCI文献。完全抗原的免疫反应性是半抗原与其连接蛋白共同决定的。
至于胶体金标记,你愿意讨论以后再说。
5楼2012-04-25 23:44:16
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