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研究、设计型实验的基本程序
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一、查阅相关资料 在确立研究课题之前或后需要查阅大量的参考文献及资料，以了解目前国内外相关研究的动态及其研究的前景然后 确定研究的目的、意义及研究的范围。 二、立题： 确立要研究的课题，是实验设计的前提，同时也决定了研究的方向和研究内容。立题的正确性和科学性关系到实验结果是否准确，结论是否可行，所以必须慎重立题。 立题的基本原则： 1.目的性、应用性：立题首先应有明确具体的目的，即通过该实验究竟要解决什么问题，这些问题必须是当前生产实践急待解决的问题，在生产实践中具有广泛的应用前景，具有一定的实践意义和理论意义同时题目要简练，不易过繁过大。一个实验能解决1—2个问题即可。 2.前瞻性、创新性：科学研究是创新工作，必须具有前瞻性和创新性，即前人尚未做过，尚未解决或做得不完善，尚未得出结论的问题，这就需要查阅大量文献和国内外科研资料，充分考虑到通过该实验研究能否（或拟）提出新的规律，新的见解、新的技术、新的方法或对原规律技术提出补充或修改。 3.科学性、可行性： 对所研究的课题，首先要有一个设想，然后设计实验去证实设想是否正确，因此立题必须有充分的科学依据。要与已证实的科学理论，科学规律相符合，不能毫无根据的凭空设想。采用的方法和技术应是先进而可行的，立题必须符合实验者的知识水平、技术水平和进行该项研究所需的实验条件。 三、实验设计 实验设计就是研究计划和实验实施方案的制定，实验方法的确立。必须根据所立课题的目的要求、预期结果，结合专业和统计学的要求，制定出周密实验内容、方法和计划，使学生在整个实验过程中有据可依，循序渐进，有条不紊地进行实验，并能提高实验研究的质量，最终达到预期目的。 （一）实验设计的内容 1.实验的方案、计划及技术路线 主要根据该实验的目的利用已知的科学规律和已有的研究成果，制定可操作（或研究）的实验途径和方案，以达到预期的实验目的，其研究设计可采用多层次、多学科、多种方法的综合性研究途径（技术路线）与方案。 2.实验方法与实验步骤 主要是进行实验（研究）时的具体实验方法和实验步骤，同一个实验也可选用几种方法进行预实验，最后确定一个最合适的方法。 3.所需的仪器、器材、药品及试剂 根据实验目的、实验方法、实验步骤选择相应的仪器，器材、备足药品和相关试剂。 4.实验动物的选择：必须是健康的水产动物（鱼、虾、贝），年龄、规格（体长、体重）、性别、来源最好基本一致，以减少个体间的生物差异。 5.处理因素：根据实验的目的，由实验者人为的加给实验动物的因素，称为处理因素，如不同的营养条件，不同的致病因子，不同的水环境因子等等。处理因素设计注意几个问题。 ① 抓住实验的主要因素 ，在一次实验中只观察一个因素的效应称为单因素效应，一次实验中观察多种因素的效应称为多因素效应。一次实验的处理因素不要过多，否则分组过多，检测指标的样本过多，实验耗时过长，且难以掌握，实验处理因素又不宜过少，否则影响实验的深度、广度和效率。 ② 处理因素的强度和标准：强度就是处理因素量的大小，药物的剂量强度必须适当，同一因素有时可设几个不同强度或不同剂量即处理因素的水平。处理因素的水平亦不宜过多。处理因素在整个实验过程中应保持不变即应标准 化，否则会影响实验结果的评价。如采用相同的计量标准对药物的质量（成分、纯度、生产厂、批号、配制方法等），仪器参数应作出统一规定并相对固定，强度亦应采用相同的剂量标准。 ③ 严格控制非处理因素 即干扰因素，除处理因素外其它因素，如处理因素为不同致病因子，那么温度、水质条件等因素即为干扰因素，需要严格控制使各组处于基本相同条件下进行实验。 6.实验效应 主要是选择什么样指标来表达和说明处理因素对实验动物的效应或影响，这包括定性指标和定量指标，主观指标和客观指标等，各指标的选择可根据如下原则。 ① 特异性 观测的指标应能特异性的反应某一特定的现象或效应，如研究抗病力，可选择相关的血液或免疫指标；研究营养状况可选择相关的消化吸收，代谢等指标。 ②客观性 所观测的指标应尽量避免由于主观因素干扰所造成的误差，应选择易于量化且可通过仪器测量和检验所获得的指标，如血液生理生化指标的检测，细菌培养结果等等。 ③ 重复性 即在相同的条件下，指标可重复出现，为提高重复性，应注意仪器的稳定性，并尽量减少操作的误差，严格控制实验动物的机能状态以及其它环境（特别是水质）条件和稳定性，重复性小的指标不宜采用。 ④精确性 各指标重复数据的平均值相接近，其差值为随机误差，观测值与真值接近程度，主要受系统误差的影响。变异较大的指标不宜选用 ⑤灵敏性 选择的指标如果灵敏性较高，则可使微小的效应显示出来，灵敏性很低，则使本应出现的效应不易出现，灵敏性较低的指标不宜选用。 ⑥可行性 就实验室的设备条件及研究者的技术水平选择检测指标，同时所选择的检测指标的检测方法应为经典的实验方法或有充分的文献依据。自己创立的检测方法，必须经过与经典的方法多次比较并有优越性的方法。 二）实验设计原则 为确保实验设计的科学性，实验设计必须遵循对照、随机、重复的原则。 1.对照原则：对照的意义在于使处理因素和非处理因素的差异有一个科学的对比。通常实验分组为对照组和处理组（实验组），影响机体、机能的因素很多，设立对照组除处理因素外，其它非处理因素均相同，这就使对照组与实验组的非处理因素影响得以抵消，而处理因素的效应更加显露，如实验动物的基本条件（规格、来源、年龄、性别等）实验环境（温度、水质条件等）实验条件（实验方法，操作过程，使用仪器等）以及检测指标等，对照组与实验组均相同，只是实验组施加了不同的处理因素，这样才能消除非处理因素的干扰和影响。 对照组的设置可根据研究目的和要求不同选用不同的对照形式如： ①空白对照组，对实验动物不加任何处理因素的空白对照组；如实验组动物注射不同的药物时，空白对照组则不注射，以排除动物本身自然生长，正常生活可能的影响。 ②实验对照组（假处理对照） 在某种相关实验条件下，进行观测，如进行相同手术，注射等，但对照组不给药（可注射生理盐水）不作关键处理，以此排除注射或手术影响。 ③标准对照组 可用标准或正常值作为对照，将实验测得的值与正常值进行比较，正常值即为标准对照，但由于水产动物机能影响因素很多常常找不到真正的标准值，所以在水产动物实验中很少采用。 ④ 自身对照 实验动物在实验前后指标变化，如根据实验前的体长、体重各项指标与给药或处理后的体长体重等各项指标的对比可判断处理前后的差异与效应。 ⑤相互对照（又称组间对照） 各实验组用不同的处理因素处理或用不同的方法处理。几种处理方法或处理因素之间互为对照。 2重复原则 由于实验动物的个体差异，重复是消除非处理因素影响的又一重要手段，只有可重复的实验结果，才是可信的、科学的，这就要求设置的实验组和对照组均需有足够的组数或样本数。如果组数和样本过少，仅在一组一次或一个样本获得的结果，往往由于个体差异，实验误差影响其结果的准确性，组数和样本又不宜过多，过多工作量太大造成人力物力的浪费，重复组与样本数的选择要根据生物统计学原理或根据文献资料，预实验结果或以往经验来决定，通常设立三个平行组（即重复组）每组8—10个动物，这样每个实验组（或对照组）可获得24—30个样本。 3 随机原则 随机原则是指在实验研究中每个动物都有均等机会被分配到任何一个组中，分组结果不受人为因素的干扰和影响，同时实验动物每次接受实验的顺序是随机的，通过随机化的处理，可使抽取的样本能够代表总体，减少抽样误差，还可使各组样本的条件尽量一致，消除或减少组间人为的误差，使处理因素效应更为客观、正确。通常在随机分组前，要对较能明显影响实验结果的因素先加以控制，如性别、年龄、大小、健康状况等，随机化方法很多，可参阅有关生物统计学。 （三）实验设计的要求 1学生应在生理、生化、病理生理和饲料营养学、水产动物疾病学等有关基础理论和应用理论的基础上，通过大量收集和阅读相关文献或根据以往实验中所观察的实验记录或生产实践中所观察到的现象或产生的问题来选定实验题目。 2立题后对该课题有关基本理论，还必须继续深入学习，认真体会，融会贯通后，制定出合理的实验方案，才能确保更好的进行实验，完成该课题各项目标。 3在设计实验方案时，应根据实验室条件所提供的仪器、设备等，并根据自己所学的知识和对查阅资料的深入了解，制定切实可行的实验方案，尽量采用简易的实验方法。 4设计每一个环节，每一个步骤都要具有科学性，严格遵守实验设计的原则，以确保研究实验结果的可信性和客观性。 5实验设计中要求学生敞开思路，自行提出问题，以问题为中心，设计实验方案，来解决提出的问题，并力求较完善的解决问题。 6实验设计要努力体现创新性、科学性、逻辑性，实验内容设计要简洁明了，目的明确。 四 预备实验 预备实验的目的，一是对选择的实验效应指标进行初步筛选；二是对实验的处理因素进行筛选；三是对实验方法进行筛选。 （一）实验效应指标的筛选：通过预实验对实验指标进行筛选，应尽量选择一些灵敏性较高，重复性较好，特异性较强而且测定简便的指标进行正式试验。 （二）处理因素的筛选：有些处理因素的强度、剂量、处理时间等等，都要经过预实验进行初步探索，方能确保正式实验的成功。 （三）实验方法的筛选： 有些用于高等动物的实验方法对低等水产动物不一定完全适用，必须熟悉实验方法与实验技术，并根据实际情况做出修改。甚至有的抗凝剂的选择，生理盐溶液的成分与配制等都要经过预实验来筛选，再如实验过程中将出现什么问题有什么值得进一步研究的线索等，都要逐一摸清。总之预实验的目的在于检查各项准备工作是否完善，实验方法和实验步骤是否可行，检测的指标是否稳定可靠，而且要初步了解试验结果与预期结果的距离，从而为选题和实验设计提供修改依据，也为正式实验提供补充和修正意见，使研究实验顺利进行，并达到预期目的。 五 正式实验 按预实验后修改的实验方案、实验方法、实验步骤进行，要求必须认真仔细的操作，并独立实践。 六实验观察、记录 （一）对运来的实验动物要进行7天左右的驯养，以使其适应新的实验环境，并淘汰不适合实验的体弱动物。 （二）实验动物分组后实验前要检测基础指标的数据，如规格（体长、体重）耗氧率等，按设组与实验需要监测。 （三）分组施加不同的处理因素后要观察动物活动状况及其产生的变化（如死亡情况、患病情况等等）即时作以处理和详细记录 （四）按阶段（以时间推移为准），采样检测各项实验指标直至实验结束并全程记录。记录的方式可以是文字、数字、表格、图形、照片或录像等。结果的记录必须做到系统、客观、真实和准确，特别要注意原始记录的原始性和真实性。 （五）记录的项目及内容。 1实验名称、实验日期、实验者 2实验动物分组，规格（体长、体重）年龄、性别、来源、健康状况等。 3施加的处理因素、种类、来源（生产厂，批号）、剂量、剂型、给药方法。 4实验仪器。 5实验条件，主要是饲养的水质条件及其饲养管理方法 6实验方法、步骤：检测内容及方法。 7实验指标名称，单位，数值及其变化曲线等。 七 实验结果的分析、处理 （一）对原始资料或数据的分析与处理：对取得的一定数量样本的原始数据，首先要进行生物统计学处理，获得可用来对实验结果的规律进行说明评价的数据（如 平均值、标准差、标准误、相关系数等等）这些经统计学处理的结果数据可以制成一定的统计表或统计图，以便进一步研究其变化规律，其次还可以做相应的统计学检验其差异的显著性或计数某些特征参数等 。 在处理原始数据时，必须坚持真实性、客观性的原则，不能凭主观愿望在计数均值或数率时，将某些数据任意取舍，必须实事求是，也不能人为地强求实验结果符合自己的假说和预期目的，而是根据实验结果去修正假说得出正确结论。 （二）实验结果的表示方法 1以表格方式表达其结果，将所得数据均值及标准差，先绘制成表格，如对定量检查的数据高低、长短、快慢、轻重、多少等，均应以法定计量单位（如 ㎜、㎝、m 、ml 、L、 g、 kg、 g/h 、kg/h、 g/ml等等）和数值予以表达并绘制成表格，一目了然。 2 以变化的曲线方式表达其结果，在可以记录到曲线变化的实验项目中，应尽量用曲线来表达实验结果，并要求在所记录到的曲线上，仔细写明各项图注，使他人易于观察和识别曲线表达的内在含义，如用纵坐标代表酶活力（单位）横坐标代表温度或pH（单位）的变化，绘制的曲线，说明了酶活力随温度或pH变化的规律等。 3 以柱形图等方式表达实验结果，可将实验结果绘成不同高低的柱形图表达其结果高低、长短、多少等。 4 以照片和录像的方式表达实验结果，许多电泳实验结果（如同工酶、蛋白质等电泳）或观察形态变化，如血细胞形态，吞噬细胞吞噬过程，均可用照片（包括显微照像）或录像记录其不同的实验结果。 （三） 研究（实验）的结论 科学研究或研究设计型实验经过立题，实验设计，预实验，正式实验，获得原始数据，再经数据分析处理，就可以根据这些处理好的数据做出研究总结得出结论，这个结论要对原提出的假说和预期的目的作出说明是否正确，同时要对实验中出现的问题或发生的新现象，并参照收集到的资料进一步做出理论解释、说明，而其结论内容必须严谨、精练、准确。 八 研究论文的撰写 撰写研究（实验）论文是科学研究的最后也是极为重要的一项工作。论文的撰写首先要以实验设计和实验结果为依据，同时一篇高质量的科研论文又要较全面的概括研究（实验）工作的全过程。充分体现研究（实验）者在整个研究（实验）中的新方法、新发现、新观念及研究价值，包括其理论意义和实践意义，同时也体现出研究（实验）的阶段性总结，为下阶段或今后的研究（实验）工作奠定基础，对于学生来说是学习一种科研方法，也是对其科研(实验)能力的考核。 （一）撰写研究（实验）论文的要求。 科学价值和表达形式是研究（实验）论文的两大要素，科学价值及水平决定于实验设计和获得的实验结果数据，表达形式则通过各数据的整理分析与写作水平来反映，因此要撰写出好的、水平较高的研究（实验）论文首先要求有严密 先进的实验设计和真实有效的实验结果；其次是准确完善的表达形式，通顺流利精练的语言，方能充分体现出研究（实验）论文的科学水平与学术价值；第三要求研究者要有较强的逻辑思维能力和表达能力，注重论文的科学性，创新性和可读性。 （二）撰写研究（实验）论文格式和内容 1研究题目：要求反映研究（实验）课题基本要素，要简明扼要，字数不超25个字。 2作者与班级：如有两者以上按贡献大小排名，并注明指导教师。 3摘要：按照目的、方法、结果、结论四个部分进行简述，要求有重要的数据，并能概括全文的主要内容与观点，字数约300－400字。 4关键词 选择主要的词5个以下。 5前言：简要说明该课题有关领域的国内外研究概况，发展动态和本研究的理论与宗旨。 6材料与方法：包括实验动物的来源、规格、实验用药品、仪器、实验分组（处理因素及处理过程）实验模型、实验过程（动物的饲养等）观察检测指标及其检测方法，数据处理方法等等 7结果：用文字及图表来表示实验结果整理出的数据。 8讨论：根据实验结果结合有关理论或参考相关文献资料进行分析、讨论，并做出相应结论。 9参考文献：列出重要参考文献，注明作者、标题、期刊、或著作、出版社、发表时间卷期、起止页码等。 |
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