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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » DNA不溶
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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他她0328

银虫 (小有名气)

[求助] DNA不溶

我大量提取基因组DNA用双蒸水溶解，但是总有块透明的东西不溶，放过夜也不溶，请问那块东西会是什么？DNA还是杂质？如果是杂质应该怎么除杂？我要建库，所以对DNA的浓度纯度片段要求都很高，跪求帮助！
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1楼 2011-09-20 09:59:55
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gaoyang636

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

应该是杂志，以前也见过，具体是啥不清楚；建库要求高的话，就不要用化学法了，还是用kit吧，比如qiagen的基因组提取试剂盒
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2楼2011-09-20 11:10:27
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他她0328

银虫 (小有名气)
跪求帮助
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3楼2011-10-07 16:14:31
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)
同问同问，我提RNA也出现这个情况，虽然提出来浓度也很高，但是那块东西是什么，一直很疑惑。
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4楼2011-10-07 18:14:30
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asznpb

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
dhd997(金币+2): good 2011-10-08 08:04:50
可能是离心管底部的塑料杂质吧，我提取DNA的时候也碰到过这样的情况……
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显微镜下的世界很精彩！
5楼2011-10-07 21:18:58
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quiller2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
dhd997(金币+2): good 2011-10-08 08:04:39
那有可能是杂质，比如蛋白质；有的时候我们发现，如果用ddH2O溶解的时候，那个不容的就是RNA。我们推测可能由于水化膜的缘故，核酸形成了胶体，用TE就好了！
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致良知
6楼2011-10-08 00:01:06
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busintramp

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
wanhscn(金币+3): Good！ 2011-10-08 13:46:52
他她0328(金币+1): 谢谢啊 2011-10-09 10:04:01
wanhscn(金币+1): 欢迎常来分子生物版回帖，有奖励！ 2011-10-26 11:42:18
我有个提议：DNA提完后以后先用TE溶解（肯定都能溶解），然后测定一下DNA的纯度，这样杂志一般也能估计个八九不离十（这个去查一下，方法很多的，比如检验熔解温度等等）。
不过个人认为很有可能是DNA浓度太高造成的。。。
呵呵~祝你好运！实验顺利~！
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7楼2011-10-08 11:54:55
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yipinyoulan

银虫 (小有名气)
★
西瓜(金币+1): Good！我自己也出现这种情况，而且我确定用的水有点偏酸，可能就是你说的情况。 2011-10-10 18:47:19
DNA不溶和双蒸水的pH偏酸性（~5）有关，你可以将其pH调高一点点，中性或略碱性，就可以融了。
这个问题，我们老师讲过，我自己没有试过，楼主可以自己试试，然后告诉我结果怎样。
不出意外就是这个原因了！
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8楼2011-10-09 15:59:56
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他她0328

银虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by busintramp at 2011-10-08 11:54:55:
我有个提议：DNA提完后以后先用TE溶解（肯定都能溶解），然后测定一下DNA的纯度，这样杂志一般也能估计个八九不离十（这个去查一下，方法很多的，比如检验熔解温度等等）。
不过个人认为很有可能是DNA浓度太高造 ...

这个应该怎么调？用NAOH？
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9楼2011-10-09 17:10:57
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他她0328

银虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by yipinyoulan at 2011-10-09 15:59:56:
DNA不溶和双蒸水的pH偏酸性（~5）有关，你可以将其pH调高一点点，中性或略碱性，就可以融了。
这个问题，我们老师讲过，我自己没有试过，楼主可以自己试试，然后告诉我结果怎样。
不出意外就是这个原因了！

这个应该怎么调？用NAOH？
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10楼2011-10-09 17:13:14
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