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wfw014

银虫 (小有名气)

[求助] 农杆菌介导

最近要做一项实验
是将苜蓿中的一个目的基因介导到大豆中,再令转基因大豆长成再生植株测其指标。
但我没有做过转基因方面的实验,现有几个问题想要请交各位:
1.如何获取目的基因
2.做农杆菌介导的实验方法和注意事项
3.如何选择质粒,载体菌和抗生素

小弟我初涉此实验,万望各位老大帮帮忙,尽量说的详细一些,万分感谢。
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lzhwin

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
amisking(金币+5, APEPI+1): 鼓励应助。 2011-09-15 19:45:34
wfw014(金币+5): 受教了,感谢你的回答 2011-09-16 21:53:26
你问的实在是太多了,如果你对这个领域不了解,首先应该做的是自己去查文献。
1、目的基因的获得可以在NCBI上找序列设计引物然后从苜蓿的cDNA里扩增,也可以直接写信向拥有这个基因的实验室索要载体。
2、大豆转基因据我所知非常困难,要不为什么只有孟山都才有真正的产品呢?自己查文献,帮不了你。
3、同第二个问题,我们转基因常用的载体是pcambia系列,菌株是HA105 抗生素是潮霉素。但是你要看大豆转基因的文献才知道你该怎么选择。

总之,查文献。
2楼2011-09-15 11:58:56
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辉辉集团

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

先看课本
再看综述
再看技术文献
3楼2011-09-15 12:03:12
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