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muxiachuixue

木虫 (正式写手)

引用回帖:
18楼: Originally posted by limiaomiao8260 at 2011-09-16 11:57:53:
嗯 你进10微升的话峰有多高?一般控制在500-1000

差不多能在这个范围,不过我主要是为了分离收集,应该和分析不一样的吧
以无法为有法,以无限为有限
21楼2011-09-16 12:29:44
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dreameg

金虫 (小有名气)

还是不要这样进两次的好,中间会产生气泡的!
22楼2011-09-16 13:16:57
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32862500

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

muxiachuixue(金币+1): 非常感谢你的建议,那我还是采取浓缩的办法吧~我本来准备配成1ml的,现在浓缩一倍的话要配成500uL了,而且样品还要过滤,在脱脂棉上残留的还要清洗,这样一来,想最终保证500uL是不是有点困难啊? 2011-09-16 17:33:30
根据你的描述,你的样品比较宝贵——你是制备样品(分离并回收),
第一你可以换定量环,这样进样量可以增大。(有环有针)
第二你可以不用换定量环,也不用换针,你只需要把你的样品浓缩一下也就是如果原来总体积是100ul浓缩到50ul这样就可以减少进样次数。

看了很多达人,有误解:20ul定量环你10ul进2次定量环里肯定小于20ul,因为会有一部分扩散,还有2针之间的气泡要占据一定的体积。 而且20ul定量环即使一次进20ul你的样品也会丢失,因为进样过程是一个置换过程(因此一些定量满环定量必须进3倍定量环体积——完全置换)。

如果需要提高样品回收率,请尽量减少进样次数,因为每次进样的固定损失时一定的,如100ul(进样一次固定损失20%,进样10次和进样5次明显进样5次损失的少)
23楼2011-09-16 17:10:48
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ntzsl

木虫 (小有名气)

引用回帖:
10楼: Originally posted by muxiachuixue at 2011-09-15 16:57:49:
谢谢你的答复,不过我指的两次进样的意思是:在load状态下进两针(因为我的针只有10uL,定量环20uL),再掰到inject状态,这样应该就不会“污染”吧?只是怕这样做会在两针之间引入气泡

这样也是不行的,前一针样品中后面的峰会和第二针前面的峰交叉,到时根本没法分离了。
大家互相学习
24楼2011-09-18 11:10:39
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muxiachuixue

木虫 (正式写手)

引用回帖:
24楼: Originally posted by ntzsl at 2011-09-18 11:10:39:
这样也是不行的,前一针样品中后面的峰会和第二针前面的峰交叉,到时根本没法分离了。

我进的是同一个样品啊。。。而且都在定量环里混合好了,怎么会有交叉呢
以无法为有法,以无限为有限
25楼2011-09-18 11:28:06
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32862500

木虫 (小有名气)

引用回帖:
25楼: Originally posted by muxiachuixue at 2011-09-18 11:28:06:
我进的是同一个样品啊。。。而且都在定量环里混合好了,怎么会有交叉呢

定量环有混合功能??  没听过。
  他指的是你进2针 就有可能出现分叉峰!~~
26楼2011-09-19 15:46:20
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张成功

新虫 (初入文坛)

用20的啊,再说用100的也不一定就进100啊
27楼2011-09-19 22:34:52
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yugijiang

木虫 (著名写手)

你可以用个卡介苗的针来打就可以了呀
28楼2012-05-24 21:34:23
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