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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » HPLC手动进样能进两次吗？
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muxiachuixue

木虫 (正式写手)
引用回帖:
18楼: Originally posted by limiaomiao8260 at 2011-09-16 11:57:53:
嗯 你进10微升的话峰有多高？一般控制在500-1000

差不多能在这个范围，不过我主要是为了分离收集，应该和分析不一样的吧
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以无法为有法，以无限为有限
21楼2011-09-16 12:29:44
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dreameg

金虫 (小有名气)
还是不要这样进两次的好，中间会产生气泡的！
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22楼2011-09-16 13:16:57
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32862500

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

muxiachuixue(金币+1): 非常感谢你的建议，那我还是采取浓缩的办法吧~我本来准备配成1ml的，现在浓缩一倍的话要配成500uL了，而且样品还要过滤，在脱脂棉上残留的还要清洗，这样一来，想最终保证500uL是不是有点困难啊？ 2011-09-16 17:33:30
根据你的描述，你的样品比较宝贵——你是制备样品（分离并回收），
第一你可以换定量环，这样进样量可以增大。（有环有针）
第二你可以不用换定量环，也不用换针，你只需要把你的样品浓缩一下也就是如果原来总体积是100ul浓缩到50ul这样就可以减少进样次数。

看了很多达人，有误解：20ul定量环你10ul进2次定量环里肯定小于20ul，因为会有一部分扩散，还有2针之间的气泡要占据一定的体积。 而且20ul定量环即使一次进20ul你的样品也会丢失，因为进样过程是一个置换过程（因此一些定量满环定量必须进3倍定量环体积——完全置换）。

如果需要提高样品回收率，请尽量减少进样次数，因为每次进样的固定损失时一定的，如100ul（进样一次固定损失20%，进样10次和进样5次明显进样5次损失的少）
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23楼2011-09-16 17:10:48
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ntzsl

木虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by muxiachuixue at 2011-09-15 16:57:49:
谢谢你的答复，不过我指的两次进样的意思是：在load状态下进两针（因为我的针只有10uL，定量环20uL），再掰到inject状态，这样应该就不会“污染”吧？只是怕这样做会在两针之间引入气泡

这样也是不行的，前一针样品中后面的峰会和第二针前面的峰交叉，到时根本没法分离了。
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大家互相学习
24楼2011-09-18 11:10:39
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muxiachuixue

木虫 (正式写手)
引用回帖:
24楼: Originally posted by ntzsl at 2011-09-18 11:10:39:
这样也是不行的，前一针样品中后面的峰会和第二针前面的峰交叉，到时根本没法分离了。

我进的是同一个样品啊。。。而且都在定量环里混合好了，怎么会有交叉呢
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以无法为有法，以无限为有限
25楼2011-09-18 11:28:06
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32862500

木虫 (小有名气)
引用回帖:
25楼: Originally posted by muxiachuixue at 2011-09-18 11:28:06:
我进的是同一个样品啊。。。而且都在定量环里混合好了，怎么会有交叉呢

定量环有混合功能？？  没听过。
  他指的是你进2针 就有可能出现分叉峰！~~
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26楼2011-09-19 15:46:20
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张成功

新虫 (初入文坛)
用20的啊，再说用100的也不一定就进100啊
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27楼2011-09-19 22:34:52
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yugijiang

木虫 (著名写手)
你可以用个卡介苗的针来打就可以了呀
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28楼2012-05-24 21:34:23
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